Question

7．經(jīng)研究得知某遺傳病是由于患者體內(nèi)缺乏某蛋白質(zhì)因子M造成的，臨床上通過注射M來治療，M可通過轉(zhuǎn)基因羊膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)．下圖是轉(zhuǎn)基因羊培育流程圖．

（1）圖中A過程以mRNA為模板合成cDNA的過程叫逆轉(zhuǎn)錄，將基因表達載體導入羊卵（母）細胞的常用方法是顯微注射法；C過程之前需對代孕母羊進行同期發(fā)情處理，之后要對代孕母羊進行妊娠的檢查．
（2）在過程B中，要用不同的限制酶對目的基因和運載體進行切割，即雙酶切割，這是為了避免目的基因和運載體自身環(huán)化以及目的基因與運載體反方向連接；由于不同的限制酶識別位點不同，有時要通過填補限制酶所產(chǎn)生的黏性末端，然后把產(chǎn)物連接起來，可以形成新的限制位點，見圖．

如圖中EcoRI、AseI、XmnI都是限制酶，它們能使核苷酸間磷酸二酯鍵鍵斷裂，產(chǎn)生黏性末端或平末端；酶①是DNA聚合酶，酶②是DNA連接酶．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中過程A表示通過發(fā)轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因，過程B表示基因表達載體的構(gòu)建，過程C表示胚胎移植．
在胚胎移植過程中，為了是受體母牛具有相同的生理狀態(tài)，需要對該母牛進行同期發(fā)情處理．

解答 解：（1）圖中A過程以mRNA為模板合成cDNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄；基因工程中常采用顯微注射法將基因表達載體導入動物細胞；C過程表示胚胎移植，為了使受體母牛具有相同的生理狀態(tài)，在胚胎移植之前需對代孕母羊進行同期發(fā)情處理，之后要對代孕母羊進行妊娠的檢查．
（2）在基因表達載體構(gòu)建過程中，為了為了避免目的基因和運載體自身環(huán)化以及目的基因與運載體反方向連接，一般用不同的限制酶對目的基因和運載體進行切割，即雙酶切割；分析圖解可知，經(jīng)過酶①的作用，兩個黏性末端的末端序列被補全，這是DNA聚合酶的作用，然后再利用DNA連接酶將兩部分類似于平末端的序列進行連接．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄     顯微注射法      同期發(fā)情       妊娠
（2）反     磷酸二酯鍵     DNA聚合     DNA連接

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因羊培育流程圖，考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．