Question

15．如圖是利用奶牛乳腺生物反應(yīng)器制備胰島素的流程圖：

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為避免人胰島素基因末端發(fā)生任意連接和運(yùn)載體的自身環(huán)化應(yīng)選用SmaⅠ、PstⅠ酶切處理目的基因和運(yùn)載體．要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異表達(dá)，應(yīng)將人胰島素基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起．⑤過(guò)程常用顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵．
（2）①過(guò)程常用促性腺激素處理奶牛A使其排出更多的卵子，然后在恰當(dāng)時(shí)期采集卵子并培養(yǎng)成熟；②過(guò)程采集的奶牛精子常用化學(xué)誘導(dǎo)（或化學(xué)）法使其獲能，與成熟的卵子在專用受精溶液中完成受精過(guò)程．受精過(guò)程中，在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間會(huì)產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精子入卵受精的第一道屏障．
（3）對(duì)移植前的胚胎需進(jìn)行性別鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)的（填“陽(yáng)性”、“陰性”）胚胎進(jìn)行移植．為了使胚胎移植能成功，需要對(duì)代孕奶牛C進(jìn)行同期發(fā)情處理，使之與供體的生理狀況保持相同．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中①表示超數(shù)排卵，獲取卵細(xì)胞，②表示獲取精子，③表示受精作用，④表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑤表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，⑥表示早期胚胎培養(yǎng)，⑦表示胚胎移植，⑧表示轉(zhuǎn)基因奶牛的分娩．

解答 解：（1）含目的基因的外源DNA分子上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，但用AluⅠ切割會(huì)破壞目的基因，單獨(dú)用PstⅠ切割會(huì)導(dǎo)致目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化，也會(huì)導(dǎo)致目的基因和載體的黏性末端發(fā)生任意連接，因此為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ分別對(duì)含人胰島素基因的DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割．要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異表達(dá)，應(yīng)將人胰島素基因與奶牛乳腺蛋白基因啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起．動(dòng)物基因工程中，將目的基因?qū)�入受精卵常采用顯微注射法．
（2）①過(guò)程常用促性腺激素處理奶牛A使其排出更多的卵子，然后在恰當(dāng)時(shí)期采集卵子并培養(yǎng)成熟；②過(guò)程采集的奶牛精子常用化學(xué)誘導(dǎo)（或化學(xué)）法使其獲能，與成熟的卵子在專用受精溶液中完成受精過(guò)程．受精過(guò)程中，在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間會(huì)產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精子入卵受精的第一道屏障．
（3）對(duì)移植前的胚胎需進(jìn)行性別鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)的，即雌性個(gè)體的胚胎進(jìn)行移植．為了使胚胎移植能成功，需要對(duì)代孕奶牛C進(jìn)行同期發(fā)情處理，使之與供體的生理狀況保持相同．
故答案為：
（1）SmaⅠ、PstⅠ奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子     顯微注射
（2）促性腺激素    化學(xué)誘導(dǎo)（或化學(xué)）    卵細(xì)胞膜
（3）陰性      同期發(fā)情

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合奶牛乳腺生物反應(yīng)器制備胰島素流程圖，考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的基本操作步驟；識(shí)記體外受精的過(guò)程和胚胎移植的基本程序，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．