8．圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，以上四種限制酶切割的堿基序列和酶切位點分別依次為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．請回答下列問題：

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是平末端，其產(chǎn)物長度為537bp、790bp、661bp．
（2）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d．從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有4種不同DNA片段．
（3）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是BamHI．在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素B的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．

7．科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（amp^r為抗氨芐青霉素基因），其中PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ為限制酶切割位點，①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟．請據(jù)圖回答有關(guān)問題．

（1）在構(gòu)建基因表達載體時，應(yīng)該選用限制酶PstⅠ和SmaⅠ分別對含魚的抗凍蛋白基因的DNA和質(zhì)粒進行切割．
（2）農(nóng)桿菌作為中間受體，重組質(zhì)粒如何進入農(nóng)桿菌：先用Ca²⁺處理細胞，使細胞成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進受體細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）③過程稱為脫分化，④過程稱為再分化．在植物組織培養(yǎng)過程中，除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)，還需要向培養(yǎng)基中添加植物激素（生長素和細胞分裂素），同時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無菌操作．
（4）將魚抗凍蛋白基因?qū)�入番茄細胞后，通常采用抗原抗體雜交技術(shù)，在分子水平上檢測目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)．

6．農(nóng)業(yè)科技工作者在煙草中找到了一抗病基因，現(xiàn)擬采用基因工程技術(shù)將該基因轉(zhuǎn)入棉花，培育抗病棉花品系．請回答下列問題：
（1）要使運載體與該抗病基因連接，首先應(yīng)使用限制性內(nèi)切酶（限制酶）進行切割．假如運載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該運載體連接的抗病基因分子末端是A．

（2）切割完成后，采用DNA連接酶將運載體與該抗病基因連接，連接后得到的DNA分子稱為重組DNA分子．
（3）再將連接得到的DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后用該農(nóng)桿菌去感染棉花細胞，利用植物細胞具有的全能性進行組織培養(yǎng)，從培養(yǎng)出的植株中篩選（選擇）出抗病的棉花．
（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，應(yīng)該用放射性同位素標記的抗病基因作為探針．
（5）科學家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的抗病基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律：
①將該轉(zhuǎn)基因植株與非轉(zhuǎn)基因植物雜交，其后代中抗病類型與不抗病類型的數(shù)量比為1：1．
②若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗病類型與不抗病類型的數(shù)量比為3：1．

5．凝乳酶能催化乳汁凝固，常用于奶酪的生產(chǎn)．為探究溫度對凝乳酶活性的影響，某同學設(shè)計了如下實驗：
①取若干試管，分為A、B、C、D、E、F六組，每組兩支試管，其中一支試管放入2mL凝乳酶，另一支放入2mL乳汁．
②將六組試管分別置于不同溫度水浴15min．
③將每組試管中的凝乳酶和乳汁混合后在原溫度下繼續(xù)水浴，記錄凝乳所需時間，結(jié)果如表．請回答問題：

組別	A	B	C	D	E	F
水浴溫度（℃）	10	20	30	40	50	60
凝乳時間（min）	不凝	7.0	4.0	1.5	4.0	不凝

（1）上述實驗中，溫度屬于自變量，各組所加凝乳酶量和乳汁量屬于無關(guān)變量．
（2）實驗結(jié)果中凝乳所需時長與酶的活性呈負（正/負）相關(guān)．
（3）A組中乳汁不凝固的原因是低溫抑制凝乳酶的活性．
（4）通過以上實驗，該同學得出“凝乳酶的最適溫度是40℃”的結(jié)論，另一同學認為尚且不足以得出此結(jié)論，理由是：應(yīng)在30-50℃溫度范圍內(nèi)縮小溫度梯度繼續(xù)實驗，若40℃下測得的凝乳時間仍然最低（或最低時間仍然是1.5min），方能得出此結(jié)論．（具體梯度不作要求，設(shè)置符合科學原則）

4．請回答基因工程、胚胎工程方面的問題?
（1）應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管牛”．試管牛的培育需經(jīng)過體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程．
（2）通常奶牛每次排出一枚卵母細胞?采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細胞常使用的激素是促性腺激素
（3）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則構(gòu)建基因表達載體時必須將目的基因與乳腺蛋白基因啟動子結(jié)合．將該基因表達載體導(dǎo)入受體細胞所采用的方法是顯微注射技術(shù)．為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛該基因表達載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細胞是受精卵（受精卵、乳腺細胞）．

3．某研究所根據(jù)植物“偏愛”的密碼子設(shè)計，通過人工合成若干DNA片段，將其拼接成為人胰島素基因，并將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)人番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素．并且在胰島素一COOH端加上KDEL內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解．回答下列問題：
（1）該科研所使用的人胰島素基因是采用人工合成的方法獲得．要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用PCR技術(shù)．該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（或Taq酶）．
（2）根據(jù)上述描述，轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，載體上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．構(gòu)建的基因表達載體中應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有CaMV35S啟動子、終止子、復(fù)制原點、果實專一性啟動子、標記基因、目的基因．
（3）如果要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可采用DNA分子雜交技術(shù)．該技術(shù)中使用的基因探針也可以用來檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA．
（4）吃這種轉(zhuǎn)基因番茄不能治療人類的I型糖尿�。ㄓ审w內(nèi)胰島素分泌不足引起），從人體相關(guān)生理分析原因可能是胰島素是蛋白質(zhì)，易被消化道內(nèi)蛋白酶水解成氨基酸，不能起到治療的作用．

2．采用干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌（　　）

	A．	接種環(huán)、吸管、培養(yǎng)基、接種室		B．	吸管、接種環(huán)、培養(yǎng)基、接種箱
	C．	培養(yǎng)基、接種環(huán)、吸管、接種箱		D．	培養(yǎng)皿、吸管、培養(yǎng)基、雙手

1．某植物的一個體細胞如圖所示．該植株的花粉進行離體培養(yǎng)后，共獲得n株幼苗，其中基因型為aabbccdd的個體有（　　）

A．

$\frac{n}{2}$株

B．

$\frac{n}{8}$株

C．

$\frac{n}{16}$株

D．

0株

20．請根據(jù)如圖回答有關(guān)問題：

（1）圖甲中①～④所示的生物工程為蛋白質(zhì)工程．該工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造出一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求．
（2）圖甲中序號④所示的獲取目的基因的方法叫做逆轉(zhuǎn)錄．
（3）若欲通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)預(yù)期蛋白質(zhì)，則構(gòu)建基因表達載體時，圖乙中序號[1]代表的是乳腺蛋白基因的啟動子；且在圖甲中⑨過程之前，要對精子進行獲能處理，篩選出保留含性染色體X的精子．
（4）為獲得較多的受精卵進行研究，圖甲中⑥過程一般用激素對供體做超數(shù)排卵處理．若圖甲中的卵母細胞來自從屠宰場收集的卵巢，則其在⑧之前需進行體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中（或M II中）期才能受精．
（5）囊胚期的早期胚胎已經(jīng)出現(xiàn)細胞分化，其中內(nèi)細胞團將發(fā)育成胎兒的各種組織． 

19．下列有關(guān)植物體生命活動調(diào)節(jié)的敘述，正確的是（　　）

	A．	生長素的跨膜運輸方式為主動運輸
	B．	植物的生長發(fā)育也受神經(jīng)調(diào)節(jié)
	C．	乙烯利是一種人工合成的植物激素，能催熟鳳梨
	D．	噴灑赤霉素使健康水稻幼苗明顯增高，能證明赤霉素促進細胞分裂