5．如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）能否利用人的皮膚細(xì)胞來(lái)完成①過(guò)程？不能．為什么？皮膚細(xì)胞中的胰島素基因未表達(dá)（或未轉(zhuǎn)錄），不能形成胰島素mRNA．
（2）過(guò)程②必需的酶是反轉(zhuǎn)錄酶，合成A的原料是四種脫氧核苷酸．
（3）在利用A、B獲得C的過(guò)程中，必須用同一種限制酶切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶，才可形成C．

4．基因工程中因受體細(xì)胞不同，目的基因?qū)�入的方法也不同，下列敘述不正確的是（　�。�

	A．	將目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞內(nèi)常用花粉管通道法
	B．	將目的基因?qū)�入小麥�?xì)胞內(nèi)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
	C．	將目的基因?qū)�入大腸桿菌內(nèi)常用感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法
	D．	將目的基因?qū)�入老鼠�?xì)胞內(nèi)常用顯微注射法

3．如圖為純種荷斯坦小奶牛的繁殖過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題．
（1）克隆動(dòng)物培育過(guò)程與圖示繁殖過(guò)程相比，特有的技術(shù)手段是核移植技術(shù)．
（2）受精卵體外培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類(lèi)外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等物質(zhì)．
（3）如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，可采用顯微注射技術(shù)將藥用蛋白基因?qū)�入受精卵中，在檢測(cè)受體細(xì)胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因時(shí)，常采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)，根據(jù)是否顯示出雜交帶進(jìn)行鑒定．
（4）純種荷斯坦奶牛的胚胎能在受體黃牛的子宮內(nèi)存活并正常發(fā)育的生理原因是受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系．

2．供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問(wèn)題．而治療性克隆能最終解決這些問(wèn)題．如圖是治療性克隆的過(guò)程圖解．

（1）正常情況下，去核的卵母細(xì)胞取自女性卵巢排卵后在輸卵管中減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞．
（2）重組細(xì)胞發(fā)育的過(guò)程中，細(xì)胞開(kāi)始分化發(fā)生在囊胚期．
（3）治療性克隆所用到的技術(shù)名稱(chēng)是核移植，要想獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎，可采用胚胎分割技術(shù)．
（4）已知病人是紅綠色盲的女性，圖中提供卵母細(xì)胞的為完全正常的年輕女性．移植器官后，該病人所生育子代紅綠色盲的情況是男孩紅綠色盲，女孩不一定．
（5）我國(guó)禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆的研究，請(qǐng)你談?wù)劄槭裁匆�反�?duì)克隆人．（至少寫(xiě)出兩條理由）①?lài)?yán)重違反了人類(lèi)倫理道德；②沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③是在人為地制造心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；④克隆技術(shù)尚不成熟，可能克隆出有嚴(yán)重生理缺陷的孩子．

1．現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請(qǐng)回答問(wèn)題．

（1）①過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄，②過(guò)程用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，它的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)，尾端必須有終止子，標(biāo)記基因的作用為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，③過(guò)程常用的方法是顯微注射法，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因．
（3）從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用的方法抗原-抗體雜交
（4）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的抗原蛋白作為疫苗．

20．如圖為吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉(zhuǎn)人賴(lài)氨酸基因的克隆�！翱椗�”的大致過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題．

（1）克隆�！翱椗�”的誕生過(guò)程中涉及到的細(xì)胞水平的現(xiàn)代生物技術(shù)主要有：核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植 （至少答出兩項(xiàng)）
（2）實(shí)施基因工程包括四個(gè)基本操作步驟，其核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，實(shí)現(xiàn)②過(guò)程的常用方法是顯微注射法
（3）現(xiàn)有-長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)（by）的DNA分子，用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，說(shuō)明此DNA分子為環(huán)狀 （填“線(xiàn)性”或“環(huán)狀”），用Kpn I單獨(dú)酶切得到400by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同時(shí)酶切后得到200by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子．請(qǐng)繪出該DNA分子的酶切圖譜的示意圖： （請(qǐng)?jiān)趫D中標(biāo)明限制酶的類(lèi)型、酶切位點(diǎn)和堿基長(zhǎng)度）．

19．限制性?xún)?nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA序列并進(jìn)行剪切，不同的限制性?xún)?nèi)切酶可以對(duì)不同的核酸序列進(jìn)行剪切．現(xiàn)以3種不同的限制性?xún)?nèi)切酶對(duì)6.2kb大小的線(xiàn)狀DNA進(jìn)行剪切后．用凝膠電泳分離各核酸片段，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示：

請(qǐng)問(wèn)：3種不同的限制性?xún)?nèi)切酶在此DNA片段上相應(yīng)切點(diǎn)的位置是（　�。�

	A．
	B．
	C．
	D．

18．某線(xiàn)性DNA分子含有3 000個(gè)堿基對(duì)（bp），先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表．限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示．下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（　　）

a酶切割產(chǎn)物（bp）	b酶再次切割產(chǎn)物（bp）
1600；1100；300	800；300

	A．	在該DNA分子中，a酶與b酶的識(shí)別序列分別有3個(gè)和2個(gè)
	B．	a酶與b酶切出的黏性末端不能相互連接
	C．	a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵不同
	D．	用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)該DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作，若干循環(huán)后，$\left.\begin{array}{l}{-AGATCC-}\\{-TCTAGG-}\end{array}\right.$序列會(huì)明顯增多

17．近些年來(lái)，棉鈴蟲(chóng)在我國(guó)大面積爆發(fā)成災(zāi)，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失；隨之而來(lái)，化學(xué)農(nóng)藥的產(chǎn)量和種類(lèi)也在逐年增加，但害蟲(chóng)的抗藥性也在不斷增強(qiáng)．針對(duì)這種情況，我國(guó)科學(xué)家采用基因工程技術(shù)，開(kāi)展了“轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉”的研究，成功地將細(xì)菌的毒蛋白基因?qū)�入到棉花�?xì)胞中，從而使棉花植株的細(xì)胞內(nèi)能合成這種毒蛋白．以后棉鈴蟲(chóng)再啃食這種棉花時(shí)，就會(huì)攝入毒蛋白，雖吃得很飽，但不能消化，最后只能慢慢餓死．這就是轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉不易受到害蟲(chóng)侵害的原因．據(jù)以上材料，分析回答下列問(wèn)題：
（1）細(xì)菌的基因之所以能嫁接到棉花體內(nèi)，原因是①組成細(xì)菌和植物的DNA分子的空間結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成相同 ②有互補(bǔ)的堿基序列．
（2）科學(xué)家預(yù)言，此種“轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉”獨(dú)立種植若干代以后，將出現(xiàn)不抗蟲(chóng)的植株，此現(xiàn)象來(lái)源于基因突變
（3）在此過(guò)程中所用的質(zhì)粒載體通常來(lái)自于下列哪種微生物A
A．土壤農(nóng)桿菌    B．大腸桿菌    C．枯草桿菌     D．放線(xiàn)菌
（4）某棉農(nóng)在食用該抗蟲(chóng)棉種子壓榨的棉籽油炒的芹菜后，出現(xiàn)鼻塞流涕，皮膚騷癢難忍癥狀，一段時(shí)間后這些癥狀又自然消失，該現(xiàn)象可能是過(guò)敏反應(yīng)
（5）利用基因工程技術(shù)培育抗蟲(chóng)棉，相比傳統(tǒng)的雜交育種方法，其優(yōu)點(diǎn)主要表現(xiàn)為能根據(jù)人類(lèi)的需要，定向改造遺傳物質(zhì)，獲得優(yōu)良遺傳性狀．

16．在胰島素的基因與質(zhì)粒形成重組DNA分子的過(guò)程中，下列哪組時(shí)所需要的（　�。�

	A．	用同一種限制酶切割兩者		B．	不需用同一種限制酶切割兩者
	C．	加入適量的DAN連接酶		D．	不需加DNA連接酶