Question

2．萌發(fā)的禾谷類種子中淀粉酶活性較強，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活．實驗材料：萌發(fā)3天的小麥種子（芽長約1cm）．
主要試劑及儀器：麥芽糖標準液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋等．
實驗步驟：
步驟一：制作麥芽糖梯度液．取7支干凈的具塞刻度試管，編號，按表加入試劑，再將試管置于60℃水浴中加熱2min，取出后按試管號順序排列．

試劑	試管號
	1	2	3	4	5	6	7
麥芽糖標準液（mL）	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸餾水（mL）	2.0	1.8	1.4	1.0	X	Y	Z
斐林試劑（mL）	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

步驟二：萌發(fā)3天的小麥種子制備淀粉酶溶液．
步驟三：將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷卻．
步驟四：另取四支試管，編號A、B、C、D，向A、B試管中各加5mL 5%淀粉溶液，向C、D試管中分別加入2mL已經處理的酶溶液（忽略其中含有的少量麥芽糖）和蒸餾水，將四支試管置于40℃恒溫水浴中保溫10min，然后將C、D試管中的溶液分別加入到A、B試管中，搖勻后繼續(xù)在40℃恒溫水浴中保溫10min．
步驟五：取A、B試管中反應溶液各2mL分別加入E、F試管，然后向E、F試管分別加入2mL斐林試劑，60℃水浴加熱2min，觀察顏色變化．
結果分析：將E試管中顏色與步驟一中獲得的麥芽糖標準液進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出α-淀粉酶催化效率．
請分析回答：
（1）本實驗的目的是測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率．
（2）步驟一的5～7試管中加入蒸餾水的量（X、Y、Z）分別是0.6、0.4、0 （單位mL）；該步驟的作用是對照．
（3）實驗中B試管所起的具體作用是檢測實驗使用的淀粉溶液中是否存在還原糖．
（4）請補全步驟五的做法2mL斐林試劑，60℃水浴加熱2min后．
（5）若要測定另一種淀粉酶的活性，則需在步驟三進行改變．

Answer 1

分析 分析表格：實驗設計要遵循單一變量原則，1～4號中溶液總量為4ml，為了保證各試管中試劑量相等，表中X應為0.6ml、Y應為0.4ml、Z應為0ml．實驗的步驟三中，將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min，這樣β-淀粉酶已經失活，但α-淀粉酶較耐熱，仍具有生物活性，所以本實驗的目的是測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率．

解答 解：（1）β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活，而本實驗的步驟三中，將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min，這樣β-淀粉酶已經失活，但α-淀粉酶較耐熱，仍具有生物活性，所以本實驗的目的是測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率．
（2）實驗設計要遵循單一變量原則，所以為了保證各試管中試劑量相等，步驟一的5～7試管中加入蒸餾水的量（X、Y、Z）分別是 0.6、0.4、0，使試劑量均為2．；該步驟的作用是對照．．
（3）斐林試劑能與還原糖溶液產生磚紅色沉淀，所以實驗中B試管所起的具體作用是檢測使用的淀粉液中是否有還原糖．
（4）根據(jù)圖表可知，向E、F試管分別加入的是2 mL斐林試劑，并在60℃水浴條件下加熱2 min．
（5）因為酶具有專一性，所以要測定另一種淀粉酶的活性，則需在步驟三中加入不同的酶．
故答案為：
（1）小麥種子中α-淀粉酶催化效率   
（2）0.6、0.4、0    對照　
（3）檢測實驗使用的淀粉溶液中是否存在還原糖
（4）2 mL斐林試劑  60℃水浴加熱2 min后
（5）三

點評 本題考查酶活性的有關知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷并得出正確的結論的能力；具備對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析和處理的能力．