Question

18．乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應(yīng)用價(jià)值．乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

（1）篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源．培養(yǎng)基中瓊脂的作用是凝固劑．從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）培養(yǎng)微生物L(fēng)前，宜采用灼燒方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌．
（3）純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其分子量大�。�在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快，說明其分子量越小．
（4）乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法（共價(jià)鍵結(jié)合法）進(jìn)行固定化，可通過檢測(cè)固定化乳糖酶的（ 酶）活性[或（酶）活力]確定其應(yīng)用價(jià)值．除化學(xué)結(jié)合法外，酶的固定化方法還包括包埋法、物理吸附法、離子吸附法及交聯(lián)法等．

Answer 1

分析 篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源，即利用選擇培養(yǎng)基篩選．
固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法（交聯(lián)法），由于細(xì)胞相對(duì)于酶來說更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法，固定化細(xì)胞在多步酶促反應(yīng)中發(fā)揮連續(xù)催化作用，但如果反應(yīng)底物是大分子物質(zhì)，則難以自由通過細(xì)胞膜，從而限制固定化細(xì)胞的催化反應(yīng)．固定化酶實(shí)質(zhì)上是將相應(yīng)酶固定在不溶于水的載體上，實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，并提高酶穩(wěn)定性，酶的各項(xiàng)特性（如高效性、專一性和作用條件的溫和性）依然保持．

解答 解：：（1）已知乳糖乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源，培養(yǎng)基中瓊脂的作用是凝固劑，從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為了避免雜菌污染，在培養(yǎng)微生物前，對(duì)接種環(huán)等接種工具應(yīng)采用灼燒滅菌．
（3）用電泳法純化乳糖酶時(shí)，若在相同條件下分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越小，電泳速度越快．
（4）固定化酶的應(yīng)用價(jià)值與酶的活性（或活力）有關(guān)，因此用化學(xué)結(jié)合法固定化乳糖酶時(shí)，可通過檢測(cè)固定化乳糖酶的活性（或活力）來確定其應(yīng)用價(jià)值．固定酶 化的方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法、離子吸附法及交聯(lián)法等．
故答案為：
（1）乳糖 凝固劑 選擇培養(yǎng)基
（2）灼燒
（3）小
（4）（ 酶）活性[或（酶）活力]包埋法   物理吸附法

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的分離及固定化酶技術(shù)和細(xì)胞固定化技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題和解決問題的能力．