Question

7．如圖為人工合成reAnti基因，轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞，做成轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）人工合成的reAnti基因可通過(guò)PCR技術(shù)手段迅速擴(kuò)增．
（2）過(guò)程③要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的方法是顯微注射法，重組質(zhì)粒導(dǎo)入之后，可通過(guò)DNA分子雜交技術(shù)，來(lái)檢測(cè)reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上．
（3）從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)，向培養(yǎng)箱中通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的PH值；培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，一般還應(yīng)添加動(dòng)物血清．
（4）去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期期．其去核后與成纖維細(xì)胞通過(guò)電刺激后融合，形成重組細(xì)胞．再利用物理或化學(xué)方法刺激，使之完成細(xì)胞分裂和發(fā)育，在體外培養(yǎng)成重組早期胚胎．
（5）在進(jìn)行過(guò)程⑦操作前，應(yīng)利用激素對(duì)受體母豬進(jìn)行同期發(fā)情處理．

Answer 1

分析 分析題圖：①是獲取目的基因的過(guò)程；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的過(guò)程；④采用顯微技術(shù)去核；⑤是核移植過(guò)程；⑥動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程；⑦是胚胎移植過(guò)程；⑧是妊娠形成轉(zhuǎn)基因克隆豬的過(guò)程．

解答 解：（1）人工合成的reAnti基因可通過(guò)PCR技術(shù)手段擴(kuò)增．
（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法；檢測(cè)目的基因（reAnti基因）是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，使動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要放入到95%的空氣（保證細(xì)胞代謝）和5%CO₂（調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH）培養(yǎng)箱中．培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，一般還應(yīng)添加動(dòng)物血清．
（4）去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟．
（5）胚胎移植前，應(yīng)利用激素對(duì)受體母豬進(jìn)行同情發(fā)情處理，目的是使胚胎移植入相同的生理環(huán)境．
故答案為：
（1）PCR        
（2）顯微注射法        DNA分子雜交
（3）胰蛋白酶或膠原蛋白酶        維持培養(yǎng)液的PH值        動(dòng)物血清
（4）減數(shù)第二次分裂中期        
（5）同期發(fā)情

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，考查基因工程的原理和技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱(chēng)；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念及過(guò)程；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件．