Question

5．某實(shí)驗(yàn)小組從土壤中分離獲得了產(chǎn)生淀粉酶的芽孢桿菌，但因其對(duì)淀粉的轉(zhuǎn)化效率低，嘗試對(duì)其進(jìn)行改造，以獲得對(duì)淀粉轉(zhuǎn)效率高的菌株．
回答下列問題：
（1）為獲得對(duì)淀粉轉(zhuǎn)化率高的菌株進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：
第一步：配制以淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基，并進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理，檢測(cè)制作的培養(yǎng)基是否無菌的方法是將空培養(yǎng)基置于無菌其他條件適宜的條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生．
第二步：將含有分解淀粉的芽孢桿菌的菌液適當(dāng)稀釋后，涂布在平板上，隨即用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是誘導(dǎo)產(chǎn)生基因突變．
第三步：將用紫外線照后的菌株放入恒溫箱中培養(yǎng)，菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍培養(yǎng)基顏色變化和變化范圍的大小，周圍出現(xiàn)透明圈現(xiàn)象的菌落即為初選擇菌落．
第四步：經(jīng)分離、純化后可獲得對(duì)淀粉轉(zhuǎn)化率高的菌株．
（2）如圖是對(duì)淀粉轉(zhuǎn)效率高的菌株純化培養(yǎng)過程中，劃線接種培養(yǎng)的結(jié)果．圖在②（填圖中編號(hào)）區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生單個(gè)菌落的最初細(xì)菌數(shù)目是1個(gè)細(xì)菌．據(jù)圖分析，在培養(yǎng)基上劃線接種時(shí)，劃線的順序依次是①③②（用編號(hào)表示）．
（3）實(shí)驗(yàn)后，所用過的培養(yǎng)基需要統(tǒng)一進(jìn)行高壓蒸氣滅菌法滅菌后再丟棄．

Answer 1

分析 從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，富集培養(yǎng)可以使用液體培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌必須使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．

解答 解：（1）第一步：篩選淀粉分解菌需要配置使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．檢測(cè)制作的培養(yǎng)基是否無菌的方法是將空培養(yǎng)基置于無菌其他條件適宜的條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生，若有菌落產(chǎn)生，則培養(yǎng)基被污染，否則沒有被污染．
第二步：實(shí)驗(yàn)中用適當(dāng)劑量的紫外線照射的目的是誘導(dǎo)產(chǎn)生基因突變．
第三步：淀粉與碘液呈藍(lán)色，淀粉分解菌會(huì)分解淀粉使得菌落周圍出現(xiàn)透明圈，所以周圍出現(xiàn)透明圈的菌落就是初選擇菌落．
（2）據(jù)圖分析，圖中的②區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生單個(gè)菌落的最初細(xì)菌數(shù)目是1個(gè)細(xì)菌細(xì)胞．根據(jù)各區(qū)域菌落的生長(zhǎng)多少判斷圖中在培養(yǎng)基上劃線接種時(shí)，劃線的順序依次是①③②．
（3）為防止使用過的培養(yǎng)基污染環(huán)境，所用過的培養(yǎng)基需要統(tǒng)一進(jìn)行高壓蒸氣滅菌法滅菌后再丟棄．
故答案為：
（1）淀粉 將空培養(yǎng)基置于無菌其他條件適宜的條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生    誘導(dǎo)產(chǎn)生基因突變   透明圈
（2）②1  ①③②
（3）高壓蒸氣滅菌法滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的篩選與分離，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的識(shí)記、理解與運(yùn)用．