Question

8．2013年初，我國部分地區(qū)陷入嚴(yán)重的霧霾和污染天氣中，北京的空氣污染指數(shù)PM2.5曾接近1000．據(jù)統(tǒng)計，北京近十年來肺癌患者增加了60%，引起肺癌的因素有多種，如大氣污染、吸煙、免疫力降低等．分析以下材料，回答相關(guān)問題：
研究人員利用基因工程技術(shù)對肺癌的治療進行了大量研究，肺部細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強，會引發(fā)肺癌．研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)�入肺癌�?xì)胞實現(xiàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制．
該基因工程技術(shù)基本流程如圖所示，據(jù)圖回答．

（1）進行過程①時，需用同種限制性核酸內(nèi)切酶酶切割質(zhì)粒、含let-7基因的DNA片段．
（2）進行過程②時，需用胰蛋白酶酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于細(xì)胞培養(yǎng)．
（3）let-7基因需采用PCR技術(shù)擴增，該過程需要用到耐高溫的DNA聚合酶．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：分圖1表示利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)�入肺癌�?xì)胞的流程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示用胰蛋白酶處理組織細(xì)胞，使之成為單個細(xì)胞，再加細(xì)胞懸液進行細(xì)胞培養(yǎng)的過程．
圖2表示let-7基因影響癌基因RAS的表達(dá)的原理，let-7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細(xì)胞中的RAS蛋白含量減少，進而導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖受到抑制．

解答 解：（1）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶對載體和含let-7基因的DNA片段進行切割，以便于目的基因的插入．
（2）過程②表示動物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個的細(xì)胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進行傳代培養(yǎng)．
（3）let-7基因需采用PCR技術(shù)擴增，該過程需要用到耐高溫的DNA聚合酶．
故答案為：
（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶   質(zhì)粒   含let-7基因的DNA片段
（2）胰蛋白酶
（3）PCR  耐高溫的DNA聚合

點評 本題考查基因工程的原理和技術(shù)、遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟．要求能分析圖1，準(zhǔn)確判斷各過程的名稱；掌握遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)過程，并能利用圖2信息答題．