Question

14．有些細(xì)菌可分解原油，從而消除有原油泄露造成的土壤污染．某同學(xué)欲從污染的土壤中采用富集培養(yǎng)的方法篩選出高效降解原油的細(xì)菌、經(jīng)過的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定，實(shí)驗(yàn)過程如圖1所示，請分析回答：

（1）如圖A、B是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請分析接種的具體方法．
圖A所示的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B所示的接種方法是平板劃線法．
（2）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）在操作④時(shí)，為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋處理．各取0.1mL 已稀釋10³倍的菌液分別接種到圖A 的三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則原始培養(yǎng)液③中每毫升菌體數(shù)為5.6×10⁵個(gè)．
（4）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是增大分解原油微生物的比例．在培養(yǎng)過程中，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快．分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中氧氣的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率．
（5）實(shí)驗(yàn)中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止微生物的擴(kuò)散．

Answer 1

分析 富集培養(yǎng)技術(shù)實(shí)際是一種選擇分離微生物的技術(shù)，其所用培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基．本題是利用生物對特殊碳源的需求，配制特殊的培養(yǎng)基來進(jìn)行生物的篩選，解答過程中要注意運(yùn)用無菌操作的一些技術(shù)要求．

解答 解：（1）據(jù)圖分析：圖A中菌落均勻分布，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線法．
（2）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）每毫升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為：（55+56+57）÷3÷0.1×10³=5.6×10⁵個(gè)．  
（4）經(jīng)過①②③的重復(fù)培養(yǎng)，增大了分解原油微生物的比例．由題意可知，振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快，由此可以說明該細(xì)菌是需要菌，由于振蕩培養(yǎng)提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，細(xì)菌生長速度加快．
（5）實(shí)驗(yàn)中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止微生物的擴(kuò)散．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法   平板劃線法
（2）土壤樣品稀釋液   原油    選擇
（3）5.6×10⁵
（4）增大分解原油微生物的比例      溶解氧（氧氣）  營養(yǎng)物質(zhì)
（5）滅菌

點(diǎn)評 本題主要考查目的微生物的篩選與培養(yǎng)，意在強(qiáng)化學(xué)生對目的微生物的篩選過程的理解與運(yùn)用．