Question

16．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：
（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有平末端和黏性末端．
（2）按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即T₄DNA連接酶和E•coliDNA連接酶．
（3）逆轉(zhuǎn)錄作用的模板是mRNA（或RNA），產(chǎn)物是cDNA．
（4）基因工程中除質(zhì)粒外，動(dòng)植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運(yùn)載體．
（5）理論上，基因組文庫(kù)含有生物的全部基因；而cDNA文庫(kù)中含有生物的部分基因．基因組文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中將目的基因與載體連接，最常用的載體的基本組成單位為脫氧核苷酸．
（6）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有平末端和黏性末端．
（2）按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即T₄DNA連接酶和E•coliDNA連接酶．
（3）逆轉(zhuǎn)錄是指以mRNA為模板合成cDNA的過(guò)程，因此逆轉(zhuǎn)錄作用的模板是mRNA（或RNA），產(chǎn)物是cDNA．
（4）基因工程常用的運(yùn)載體有：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
（5）理論上，基因組文庫(kù)含有生物的全部基因；而cDNA文庫(kù)中含有生物的部分基因．基因組文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中將目的基因與載體連接，最常用的載體是質(zhì)粒，其化學(xué)本質(zhì)是DNA，因此其基本組成單位為脫氧核苷酸．
（6）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．
故答案為：
（1）平末端    黏性末端  
（2）T₄　　E•coli　
（3）mRNA（或RNA）　cDNA
（4）動(dòng)植物病毒 　 λ噬菌體的衍生物　
（5）全部    部分     脫氧核苷酸
（6）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的作用及各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．