Question

4．利用葡萄汁生產(chǎn)的葡萄酒、葡萄醋深受市場歡迎，某校一生物實驗小組嘗試使用罐頭瓶在常溫（21±3℃）下制作葡萄酒．請回答
（1）開始時，向消過毒的罐頭瓶中加入新鮮的葡萄汁作為酵母菌的液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般包括有水、碳源、氮原和無機(jī)鹽．葡萄汁裝入瓶中要留出大約$\frac{1}{3}$的空間．在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉．通氣的目的是提高酵母菌的數(shù)量．在以后的過程中，每隔12小時左右將瓶蓋擰松一次，此后再擰緊，這樣做的目的是排出CO₂，
防止雜菌污染．
（2）從野生酵母菌群中分離純化酵母菌，常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種．若計數(shù)酵母菌活菌的個數(shù)，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30～300 之間、適于計數(shù)的平板．也可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)；
（3）分離純化出的酵母菌在-20℃長期保存，菌液中需要加入一定量的甘油（填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”）

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
2、果酒和果醋制作過程中的相關(guān)實驗操作：
（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗．
（2）滅菌：①榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干．②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒．
（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁．
（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶，要留要大約$\frac{1}{3}$的空間，并封閉充氣口．②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進(jìn)行．及時的監(jiān)測．
③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣．

解答 解：（1）微生物分離與培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分一般包括水、碳源、氮原和無機(jī)鹽．葡萄汁裝入瓶中要留出大約$\frac{1}{3}$的空間．在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉．通氣的目的是讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，從而大量繁殖，提高酵母菌的數(shù)量．在以后的過程中，酵母菌無氧呼吸會產(chǎn)生酒精和二氧化碳，為了排出CO₂，防止雜菌污染需要每隔12小時左右將瓶蓋擰松一次，此后再擰緊．
（2）從野生酵母菌群中分離純化酵母菌，常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種．若計數(shù)酵母菌活菌的個數(shù)，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30～300 之間、適于計數(shù)的平板．也可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)；
（3）分離純化出的酵母菌在-20℃長期保存，菌液中需要加入一定量的甘油．
故答案為：
（1）水、碳源、氮原  提高酵母菌的數(shù)量  排出CO₂，防止雜菌污染
（2）平板劃線法 稀釋涂布平板法   30～300   血細(xì)胞計數(shù)板
（3）甘油

點(diǎn)評 本題考查果酒和果醋的制作、微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記參與果酒和果醋制作的微生物及其代謝類型；識記接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．