Question

6．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)操作的說法中正確的是（　　）

• A． 該實(shí)驗(yàn)中有兩次加入蒸餾水，均是為了析出DNA
• B． 該實(shí)驗(yàn)中多次要求用玻璃棒單向攪拌，目的是攪拌均勻
• C． 該實(shí)驗(yàn)中有3次過濾，過濾時(shí)使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān)
• D． 實(shí)驗(yàn)3次加入NaCl溶液，第二次的目的是析出DNA

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色．
2、DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：A、該實(shí)驗(yàn)中有兩次加入蒸餾水，第一次是為了讓細(xì)胞吸水脹破，第二次是為了析出DNA，A錯(cuò)誤；
B、該實(shí)驗(yàn)中多次要求用玻璃棒單向攪拌，目的不都是攪拌均勻，如加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后攪拌的目的是提取出DNA分子，B錯(cuò)誤；
C、該實(shí)驗(yàn)中有3次過濾，過濾時(shí)使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān)，C正確；
D、實(shí)驗(yàn)3次加入NaCl溶液，第二次的目的是溶解DNA，B錯(cuò)誤．
故選：C．

點(diǎn)評(píng) 本題考查DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累．