Question

10．請回答有關(guān)物質(zhì)提取、微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的問題：
（1）實驗室分離葉綠體中的色素常用的方法是紙層析法；從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法．
（2）微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵．常用的對培養(yǎng)皿進行滅菌的方法是干熱滅菌法．
（3）從土壤中分離尿素分解菌的過程中，應(yīng)向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．
（4）純化菌種和統(tǒng)計某活菌的數(shù)目時，宜采用的接種方法是稀釋涂布平板法，用這種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，其原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．

Answer 1

分析 1．無菌技術(shù)：
（1）關(guān)鍵：防止外來雜菌的入侵．
（2）具體操作：
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒．
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌．
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行．
④實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸．
（3）消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

2、稀釋涂布法：是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)．在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落．能夠測定樣品中活菌數(shù)的方法是：稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）分離葉綠體中的色素常用的方法是紙層析法．由于胡蘿卜素易溶于有機溶劑，因此常用有機溶劑來萃取胡蘿卜素．
（2）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵．常用的對培養(yǎng)皿進行滅菌的方法是干熱滅菌法．
（3）微生物的鑒定常用鑒別培養(yǎng)基，在尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．
（4）純化菌種和統(tǒng)計某活菌的數(shù)目時，計數(shù)方法一般有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法．用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，由于所產(chǎn)生的菌落可能是由兩個或多個細(xì)胞形成的，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏少．
故答案為：
（1）紙層析法   　  萃取
（2）防止外來雜菌的入侵   　干熱滅菌法
（3）以尿素為唯一氮源的    　酚紅
（4）稀釋涂布平板法   　當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

點評 本題主要考查提取和分離色素實驗、微生物實驗室培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考查考生對相關(guān)知識的理解，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．