Question

8．為了獲得抗體基因功能缺失的轉(zhuǎn)基因山羊，擬采用體細(xì)胞基因打靶技術(shù)，通過體細(xì)胞的同源重組，敲除山羊的抗體重鏈基因，并以其為受體轉(zhuǎn)入人的抗體基因，用于制備完全人源化抗體．獲得抗體基因功能缺失的轉(zhuǎn)基因山羊的過程如圖所示．

（1）過程①的處理方法是胰蛋白酶．
（2）過程②中每3～4天更換一次培養(yǎng)液，目的是清除代謝廢物．為了防止培養(yǎng)過程雜菌污染，培養(yǎng)液中需添加一定量的抗生素．
（3）過程③電穿孔的目的是誘導(dǎo)質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞．使GTIgH質(zhì)粒線性化的處理方法是用限制酶處理．
（4）過程⑤PCR鑒定的過程是將細(xì)胞中的DNA提取出來，用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，然后用DNA分子雜交原理進(jìn)行鑒定．
（5）經(jīng)過程⑤獲得的抗體基因功能缺失的細(xì)胞不能直接誘導(dǎo)分化得到抗體基因功能缺失的轉(zhuǎn)基因山羊，原因是動(dòng)物細(xì)胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變?nèi)酰?br />（6）過程⑥涉及到的技術(shù)有細(xì)胞核移植．

Answer 1

分析 據(jù)圖示可知，①②為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，③為誘導(dǎo)質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程，④為細(xì)胞培養(yǎng)過程，⑤為特定細(xì)胞的篩選過程，⑥為動(dòng)物克隆過程．

解答 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需用胰蛋白酶處理組織，形成分散的細(xì)胞懸液，然后進(jìn)行原代培養(yǎng)；待細(xì)胞貼滿瓶壁后，再用胰蛋白酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，進(jìn)行傳代培養(yǎng)．
（2）過程②中每3～4天更換一次培養(yǎng)液，目的是清除代謝廢物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．由于抗生素能抑制細(xì)菌生長，為了防止培養(yǎng)過程雜菌污染，培養(yǎng)液中需添加一定量的抗生素．
（3）過程③電穿孔的目的是誘導(dǎo)質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞．使GTIgH質(zhì)粒線性化的處理方法是用限制酶處理．
（4）鑒定DNA分子是否含有特定的基因可用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行鑒定．
（5）動(dòng)物細(xì)胞不能直接培養(yǎng)獲得動(dòng)物體，原因是動(dòng)物細(xì)胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變?nèi)酰?br />（6）過程⑥為克隆過程，涉及到的技術(shù)有細(xì)胞核移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶 
（2）清除代謝廢物  抗生素 
（3）誘導(dǎo)質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞  限制酶
（4）DNA分子雜交 
（5）動(dòng)物細(xì)胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變?nèi)?nbsp; 
（6）細(xì)胞核移植

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的應(yīng)用和細(xì)胞過程等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確判斷的能力．