Question

【題目】海洋藻類上常附著有多種微生物，其中部分在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟價值，而部分會產(chǎn)生某些毒素污染環(huán)境或毒害動物，人們需要對它們進行大量的研究。請回答下列問題：

(1)若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，正確的是圖_________，其正確操作過程中，劃線工具至少要灼燒_________次。

(2)長期保存菌種時，應(yīng)將培養(yǎng)的菌液與___________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱保存，丟棄已經(jīng)接種過微生物的培養(yǎng)基前，往往需要先行滅菌，以免____________________。

(3)A、B兩組同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時間記錄數(shù)據(jù)（統(tǒng)計時間內(nèi)微生物總數(shù)在增長過程中），得到以下結(jié)果：

培養(yǎng)時間（小時）	24	48	72	96
A組菌落均值（個）	18	25	36	32
B組菌落均值（個）	20	28	38	32

計數(shù)時最好取72小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結(jié)果，原因是①__________________；

②_____________。

(4)發(fā)酵工程常常需要對某些微生物進行固定，最常用的方法是_____________法。某真菌產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用_____________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。

Answer 1

【答案】B 5 甘油 污染環(huán)境或者對其他生物產(chǎn)生毒害 ①培養(yǎng)時間不足，遺漏菌落數(shù)目； ②培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落（兩空位置可以互換） 包埋 萃取法

【解析】

1、平板劃線的操作要點：將接種環(huán)放在火焰上，灼燒接種環(huán)直到燒紅；在火焰旁將接種環(huán)冷卻后，并打開盛有菌液的試管的棉塞，將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)深入菌液中，蘸取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞，左手將培養(yǎng)皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃3至5條平行線，蓋上培養(yǎng)皿蓋，注意不要劃破培養(yǎng)基；灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始，往第二區(qū)域劃線重復(fù)以上操作，在第三、四區(qū)域內(nèi)劃線注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

2、固定化酶和固定化細胞技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法，將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。

(1)由分析可知：若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，圖B是正確的，其正確操作過程中，由圖中的劃線區(qū)域共四個，取菌種前以及每次劃線前和最后劃線完畢都有灼燒，故劃線工具至少要灼燒5次。

(2)菌種長期保存的方法是甘油管藏法，故應(yīng)將培養(yǎng)的菌液與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱保存，為了避免污染環(huán)境或者對其他生物產(chǎn)生毒害，丟棄已經(jīng)接種過微生物的培養(yǎng)基前，往往需要先行滅菌。

（3）為避免因為①培養(yǎng)時間不足，遺漏菌落數(shù)目，或培養(yǎng)時間過長，兩②個或多個菌落連成一個菌落，影響計數(shù)的結(jié)果，故最好取72小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結(jié)果。

(4)對于細胞經(jīng)常用包埋法進行固定，故對某些微生物進行固定，最常用的方法是包埋法。對于不易揮發(fā)的某真菌產(chǎn)生的油脂，可選用萃取法從菌體中提取。