Question

1975年Kohler和Milstein的單克隆抗體技術(shù)在生產(chǎn)和使用抗體方面開創(chuàng)了新紀(jì)元，如圖示單克隆抗體制備流程階段示意簡圖．請據(jù)圖回答下列問題：
（1）該技術(shù)是在動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和

 

技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的．
（2）圖10中細(xì)胞A體外培養(yǎng)不具有分裂能力，但能分泌

 

，細(xì)胞B體外培養(yǎng)能夠

 

．
（3）動物細(xì)胞融合常用的方法是

 

．
（4）細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，要篩選出

 

細(xì)胞．在細(xì)胞培養(yǎng)過程
中，為了促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖，常向培養(yǎng)液中加入

 

（激素）．
（5）培養(yǎng)2周后，即測定培養(yǎng)細(xì)胞的特征，篩選出

 

的細(xì)胞置于不同孔內(nèi)（如圖所示）培養(yǎng)．此操作前要將培養(yǎng)細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/ml，每孔滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液，其目的是

 

．
（6）要獲得大量的單克隆抗體，可對獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行

 

培養(yǎng)．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：單克隆抗體的制備過程中利用了動物細(xì)胞融合技術(shù)和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，在制備的過程中的兩次篩選考生必須識記．由于細(xì)胞融合的結(jié)果可能有三種情況：B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞，因此需要特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選．

解答： 解：（1）單克隆抗體的制備技術(shù)首先要利用動物細(xì)胞融合將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，然后要利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對融合的細(xì)胞進(jìn)行篩選，篩選出雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行培養(yǎng)．
（2）圖中細(xì)胞A為經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞，該細(xì)胞不具有分裂能力，但能分泌特異性抗體．細(xì)胞B為骨髓瘤細(xì)胞，該細(xì)胞能夠無限增殖．
（3）動物細(xì)胞融合常用的方法有物理法（離心、震動、電刺激）、化學(xué)法（PEG）、生物法（滅活的病毒）．
（4）HAT培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基．由于細(xì)胞融合的結(jié)果可能有三種情況：B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞，因此需要用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞．胰島素具有促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝取利用葡萄糖的作用，因此在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常向培養(yǎng)液中加入胰島素．
（5）培養(yǎng)2周后，篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞置于不同孔內(nèi)培養(yǎng)．此操作前要將培養(yǎng)細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/ml，每孔滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液，其目的是 保證每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度的目的．
（6）要獲得大量的單克隆抗體，可對獲得的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，也可利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行體外培養(yǎng)．
故答案為：
（1）動物細(xì)胞融合            
（2）分泌特異性抗體    無限增殖
（3）PEG（滅活的病毒、電刺激）     
（4）雜交瘤      胰島素
（5）特異性分泌抗X蛋白抗體的     保證每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（6）體外或體內(nèi)（體外和體內(nèi)、體外、體內(nèi)）

點評：本題考查了單克隆抗體的制備過程和動物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．