Question

6．（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度、滲透壓等條件（至少寫上兩項）．由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料．
（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的結構．
（3）若用稀釋涂布平板法計數大腸桿菌活菌的個數，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操 作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的比例合適．
（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定．
（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染．對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生
（6）若進行大腸桿菌鑒定實驗，應該在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍（染色劑），其菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤．

Answer 1

分析 1、大腸桿菌是一種細菌，屬于原核生物．大腸桿菌常作為遺傳學研究的實驗材料．
2、微生物營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH 等條件．
3、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌技術，防止外來雜菌的污染．消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

4、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

解答 解：（1）大腸桿菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點；培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件．
（2）滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的結構．
（3）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，應保證樣品稀釋的比例適合．
（4）對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定．
（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染．對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生．
（6）若進行大腸桿菌鑒定實驗，應該在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍，其菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤．
故答案為：
（1）溫度、酸堿度、滲透壓     易培養(yǎng)、生活周期短
（2）滅菌    損傷DNA的結構
（3）比例合適
（4）鑒定
（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生
（6）伊紅和美藍

點評 本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關知識，意在強化學生對微生物培養(yǎng)過程的理解與運用．