Question

正當(dāng)中國各界激烈爭(zhēng)論轉(zhuǎn)基因水稻安全問題之際，在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲．這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必須的維生素A．由于含有可以生成維生素A的β-胡蘿卜素，它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”．“金色大米”的培育流程如圖所示同，請(qǐng)回答下列問題．（已知酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-），酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-）

（1）圖中a、b所示獲得目的基因的方法是

 

．
（2）圖中c稱作

 

，它的構(gòu)成除了復(fù)制原點(diǎn)、目的基因外，還必須有

 

等．
（3）據(jù)圖分析，在構(gòu)建c的過程中，目的基因用

 

進(jìn)行了切割，檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用

 

作為標(biāo)記基因．
（4）過程d可以采用的方法是

 

．
（5）過程e運(yùn)用了細(xì)胞工程中的

 

技術(shù)，在該技術(shù)應(yīng)用的過程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行

 

和

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析圖解：圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示利用mRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因，c表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，d表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，e是水稻細(xì)胞進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)并篩選出符合要求的植株．
目的基因的兩側(cè)分別有-GGATCC-、-GATC-兩種序列，根據(jù)兩種酶的酶切位點(diǎn)，限制酶Ⅰ只能切割左側(cè)的序列，而限制酶Ⅱ可以切割兩側(cè)的序列．

解答： 解：（1）圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示逆轉(zhuǎn)錄，因此可以看出圖中a、b所示表示通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因．
（2）圖中c稱作基因表達(dá)載體，它的構(gòu)成除了復(fù)制原點(diǎn)、目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等．
（3）據(jù)圖分析，目的基因的兩側(cè)有-GGATCC-、-GATC-兩種序列，由于酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一↓GATC-，因此只能選擇限制酶Ⅱ獲取目的基因．圖中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功，需要利用基因I作為標(biāo)記基因．
（4）由于水稻屬于單子葉植物，常采用花粉管通道法．
（5）過程e是將植物細(xì)胞培養(yǎng)為完整個(gè)體，一般運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，在該技術(shù)應(yīng)用的過程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行脫分化和再分化．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法　　
（2）基因表達(dá)載體　　啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因　　
（3）限制酶Ⅱ基因Ⅰ
（4）花粉管通道法　　
（5）植物組織培養(yǎng)　　脫分化　　再分化

點(diǎn)評(píng)：本題具有一定的綜合性，難度適中，考查基因工程中目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、限制酶、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、蛋白質(zhì)工程等方面的知識(shí)，要求考生能識(shí)記基因工程技術(shù)的操作步驟，以及限制酶的作用特點(diǎn)，培養(yǎng)了考生識(shí)圖能力和審題能力．