Question

14．請回答下列有關生物技術實踐方面的問題：
（1）微生物的培養(yǎng)和鑒別技術是一項基本技術．為了從樣本中獲取細菌的單菌落，可用平板劃線法及稀釋涂布法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得．培養(yǎng)基進行滅菌時，應該采用的方法是髙壓蒸汽滅菌法．為統(tǒng)計樣品中活菌的數目，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當時間后形成菌落，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數．
（2）泡菜雖然好吃，但其中的亞硝酸鹽會危害人體健康．亞硝酸鹽在特定條件下會轉變成亞硝胺，這是一種致癌物，測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與顯色劑反應，生成玫瑰紅色物質正常情況下，隨著腌制時間的延長，亞硝酸鹽含量的變化趨勢是先增加后減少，然后基本不變．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．
2、泡菜的制作原理
泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．
3、測定亞硝酸鹽含量的原理
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．

解答 解：（1）為了從樣本中獲取細菌的單菌落，可用平板劃線法及稀釋涂布法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得．培養(yǎng)基進行滅菌時，應該采用的方法是髙壓蒸汽滅菌法．為統(tǒng)計樣品中活菌的數目，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當時間后形成菌落，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數．
（2）亞硝酸鹽在特定條件下會轉變成亞硝胺，這是一種致癌物，測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與顯色劑反應，生成玫瑰紅色物質．發(fā)酵初期，由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量有所增加；發(fā)酵中期，由于硝酸鹽還原菌受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽含量下降．所以在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽含量的變化趨勢是先增加后減少，然后基本不變．
故答案為：
（1）平板劃線      稀釋涂布     固體培養(yǎng)基    髙壓蒸汽滅菌法     30-300
（2）亞硝胺    鹽酸酸化      先增加后減少，然后基本不變

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)以及泡菜制作的有關知識，要求考查能夠掌握微生物分離與純化以及滅菌的方法，識記泡菜制作的原理以及制作過程中亞硝酸鹽含量的變化趨勢，難度適中．