Question

14．白細胞介素是一類淋巴因子．研究人員將人白細胞介素的基因?qū)�入到酵母細胞中，使其分泌出有活性的白細胞介素�?br />
（1）為增加白細胞介素基因的數(shù)量，可使用PCR技術，但前提是必須知道基因的已知序列，目的是設計引物．
（2）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用Ca²⁺處理酵母菌，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．
（3）在體液免疫過程中，白細胞介素是由T淋巴細胞分泌的，為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母細胞作為受體細胞，可能原因是細菌細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器．
（4）在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在的DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點，圖示過程獲得有效表達的重組栽體使用了EcoRl和EcoR52兩種限制酶，比使用單一的限制酶，其優(yōu)點是防止目的基因、表達載體發(fā)生自身環(huán)化或者防止目的基因反向接入到分泌型表達載體中．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體．

解答 解：（1）基因工程中，擴增目的基因的方法為PCR技術，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設計引物．
（2）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用Ca²⁺處理酵母菌，使酵母菌稱為感受態(tài)細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．
（3）在體液免疫過程中，白細胞介素是由T淋巴細胞分泌的．由于細菌屬于原核生物，細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器，因此為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母細胞作為受體細胞．
（4）在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在的DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點，圖示過程獲得有效表達的重組栽體使用了EcoRl和EcoR52兩種限制酶，比使用單一的限制酶，其優(yōu)點是防止目的基因、表達載體發(fā)生自身環(huán)化或者防止目的基因反向接入到分泌型表達載體中．
故答案為：
（1）PCR     設計引物   
（2）Ca²⁺轉(zhuǎn)化   RNA聚合酶
（3）T淋巴     細菌細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器
（4）防止目的基因、表達載體發(fā)生自身環(huán)化或者防止目的基因反向接入到分泌型表達載體中

點評 本題結(jié)合圖解，綜合考查免疫、基因工程、PCR技術等知識，要求考生識記人體免疫細胞的組成及特異性免疫過程；識記基因工程的工具及操作步驟，能運用所學的知識答題．