Question

10．回答下列有關生物工程的問題
從人的胰島細胞中制備胰島素編碼基因，將其與合適的質(zhì)粒用產(chǎn)自大腸桿菌的DNA連接酶拼接成重組分子，后者導入酵母中便可實現(xiàn)重組人胰島素的工業(yè)化生產(chǎn)，用于糖尿病的治療．
（1）下列與質(zhì)粒的基本單位相同的有①③  （填編號）
①胰島素基因     ②mRNA      ③擬核DNA      ④人胰島素
（2）若人胰島素編碼基因兩端是用限制酶PstI（識別序列和切割位點如圖2所示）切開的，那么如圖1所示的質(zhì)粒應使用限制酶NsiⅠ切開，才能保證人胰島素編碼基因與質(zhì)粒直接粘連拼接．

（3）已轉(zhuǎn)到重組質(zhì)粒上的單個人胰島素編碼基因能否再用（2）題中的限制酶切開？不能，理由是沒有相應的識別序列．
（4）將重組質(zhì)粒導入酵母細胞，并進行大規(guī)模培養(yǎng)便可獲得人胰島素產(chǎn)品．上述人胰島素產(chǎn)品生產(chǎn)過程中利用到的生物工程領域有①②．（填編號）
①發(fā)酵工程        ②基因工程      ③細胞工程      ④酶工程
（5）醫(yī)學上還利用生物工程技術將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞融合，融合后細胞經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生單克隆抗體，其理論依據(jù)有②③．（填編號）
①骨髓瘤細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖
②骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體
③B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖
④B淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合才能產(chǎn)生抗體．

Answer 1

分析 分析題圖：圖1質(zhì)粒中含有四種限制酶的切割位點；圖2五種限制酶中，限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端與限制酶PstI切割形成的黏性末端相同．

解答 解：（1）質(zhì)粒的化學本質(zhì)是DNA，其基本單位是脫氧核苷酸．胰島素基因和擬核DNA的基本單位脫氧核苷酸，mRNA的基本單位是核糖核苷酸，胰島素的基本單位是氨基酸．
（2）由圖2可知，五種限制酶中，限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端與限制酶PstI切割形成的黏性末端相同．構(gòu)建基因表達載體時應該用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，若人胰島素編碼基因兩端是用限制酶PstI切開的，則質(zhì)粒也應該用限制酶PstI切開，但質(zhì)粒中沒有該酶的識別序列和切割位點，但限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端與限制酶PstI切割形成的黏性末端相同，因此質(zhì)粒應使用限制酶 NsiⅠ切開，這樣才能保證人胰島素編碼基因與質(zhì)粒直接粘連拼接．
（3）用DNA連接酶連接目的基因與運載體后，目的基因兩側(cè)的堿基序列既不能被限制酶PstI識別，也不能被限制酶NsiⅠ識別，因此不能被這兩種酶切割．
（4）將重組質(zhì)粒導入酵母細胞需要采用基因工程技術，進行大規(guī)模培養(yǎng)需要采用發(fā)酵技術．
（5）單克隆抗體制備的原理：骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖．兩種融合形成的雜交瘤細胞既可無限增殖，也能產(chǎn)生抗體．
故答案為：
（1）①③
（2）NsiⅠ
（3）不能  沒有相應的識別序列
（4）①②
（5）②③

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的作用及操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題．