Question

要獲得遺傳特性單一的枯草桿菌菌種，一般必須對(duì)原有的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)、并利用純化技術(shù)得到單菌落的菌種．請(qǐng)回答以下問(wèn)題：
（1）獲得純凈枯草桿菌的關(guān)鍵是

 

，為此，必須對(duì)培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌．在接種或倒平板操作時(shí)，除了在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作并對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須

 

，以防止空氣中的雜菌污染．
（2）如圖是純化枯草桿菌的方法，該純化分離方法的名稱是

 

．
（3）枯草桿菌可以產(chǎn)生α-淀粉酶，以下是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶菌株的主要實(shí)驗(yàn)步驟．（原理：菌株生長(zhǎng)過(guò)程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈．）
第一步：將枯草桿菌接種到液體培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)．
第二步：將枯草桿菌分成A、B兩組，

 

．
第三步：制備多個(gè)含淀粉的固體培養(yǎng)基．
第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用

 

法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落．
第五步：觀察A、B組各菌落周圍的

 

．
實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)期：據(jù)誘發(fā)突變率低的特點(diǎn)，預(yù)期

 

；據(jù)誘發(fā)突變不定向性的特點(diǎn)，預(yù)期

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物

專題：

分析：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的侵入，因此必須對(duì)培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌．純化微生物常用稀釋涂布平板法和平板劃線法，圖中所示純化分離枯草桿菌的方法是平板劃線法．本實(shí)驗(yàn)的目的是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶菌株．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵循對(duì)照原則和單一變量原則，所以要設(shè)計(jì)空白對(duì)照組，單一變量是誘變劑處理與否．

解答： 解：（1）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的侵入，因此必須對(duì)培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌．在接種或倒平板操作時(shí)，除了在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作并對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須在酒精燈火焰旁操作，以防止空氣中的雜菌污染．
（2）由圖可知，該處純化分離枯草桿菌的方法是平板劃線法．
（3）本實(shí)驗(yàn)的目的是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶菌株．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵循對(duì)照原則和單一變量原則，所以要設(shè)計(jì)空白對(duì)照組，單一變量是誘變劑處理與否，即將枯草桿菌分成A、B兩組，A 組用誘變劑處理，B組不處理（作對(duì)照）．將A、B組分別進(jìn)行一系列梯度的稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用稀釋涂布法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落．本實(shí)驗(yàn)的原理是：菌株生長(zhǎng)過(guò)程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈．所以實(shí)驗(yàn)最后可以通過(guò)觀察A、B組各菌落周圍的透明圈大小做出判斷．因?yàn)檎T發(fā)突變率低，預(yù)期A組多數(shù)菌落周圍的透明圈與B組差異不顯著；誘發(fā)突變具有不定向性，預(yù)期A組透明圈大小不一，B組較一致．
故答案為：
（1）防止外來(lái)雜菌的侵入         在酒精燈火焰旁操作
（2）平板劃線法
（3）A 組用誘變劑處理，B組不處理（作對(duì)照）    稀釋涂布法    透明圈大小
A組多數(shù)菌落周圍的透明圈與B組差異不顯著
A組有少數(shù)菌落周圍的透明圈比B組明顯小，有少數(shù)比B組明顯大（或A組透明圈大小不一，B組較一致）

點(diǎn)評(píng)：本題考查微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用．