Question

【題目】淀粉酶在生產(chǎn)生活中有廣泛應(yīng)用。下面是透明圈法篩選高產(chǎn)淀粉酶目標(biāo)菌的示意圖�；卮鹣铝袉栴}。

（1）配制培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般都要求在含有_____等主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基砒上，還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)_______的要求。將微生物接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，應(yīng)在_____附近進(jìn)行操作。

（2）用加有可溶性淀粉的平板篩選淀粉酶產(chǎn)生菌株，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上長(zhǎng)出甲、乙菌落，碘染后發(fā)現(xiàn)乙菌落周圍有透明圈（如圖所示），由此說明乙菌落中含有______，產(chǎn)生透明圈的原因是_______________________________。

（3）對(duì)乙菌落再用稀釋涂布平板法進(jìn)一步接種培養(yǎng)，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液將___________，能對(duì)目標(biāo)菌進(jìn)行________和計(jì)數(shù)，從而獲取目標(biāo)菌。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、無機(jī)鹽 pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣 酒精燈火焰 分解淀粉的目標(biāo)菌 含淀粉的培養(yǎng)基原本不透明，但在淀粉酶的作用下，淀粉水解為單糖并為目標(biāo)菌所利用，碘染后在菌落附近就出現(xiàn)透明圈了 聚集在一起的微生物分散為單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌的菌落 分離、純化

【解析】

微生物的培養(yǎng)需要提供的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳源（提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）、氮源（提供所需氮元素所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）、水、無機(jī)鹽、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)——生長(zhǎng)因子（維生素、氨基酸、堿基等），微生物培養(yǎng)所需的條件：pH、氧氣條件、特殊營(yíng)養(yǎng)等；為了防止微生物的感染，實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在無菌條件下完成——在酒精燈火焰旁操作；透明圈法的基本原理：含有可溶性淀粉的培養(yǎng)基中培養(yǎng)微生物，生出菌落后，將菌落用碘液處理，若菌種能產(chǎn)生淀粉酶，則其附近的淀粉被水解為還原糖，因此會(huì)出現(xiàn)“透明圈”；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，若樣品的稀釋度足夠高，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌；通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能測(cè)出樣品大約的活菌數(shù)。

（1）培養(yǎng)基的成分包括水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以及pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣條件等。

（2）乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落含有分解淀粉的目標(biāo)菌，故應(yīng)選擇乙菌落進(jìn)一步純化從而得到目標(biāo)菌。

（3）對(duì)乙菌落再用稀釋涂布平板法進(jìn)一步接種培養(yǎng)，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液聚集在一起的微生物分散為單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌的菌落，能對(duì)目標(biāo)菌進(jìn)行分離、純化和計(jì)數(shù)、從而獲取目標(biāo)菌。