Question

6．請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：
（l）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，通常在合成培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是防止細(xì)菌污染．
（2）在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血清等一些天然成份，作用是補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)．
（3）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，因此要定期用胰蛋白酶處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸浮液，否則，貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖．
（4）在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常在冷凍（或超低溫、液氮）條件下保存細(xì)胞．
（5）若在營(yíng)養(yǎng)全面的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中不慎混入了一種細(xì)菌，結(jié)果所培養(yǎng)的細(xì)胞全部死亡．從科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)性的角度考慮，能不能直接認(rèn)為這些細(xì)胞的死亡就是該種細(xì)菌作用而導(dǎo)致的？不能，理由是也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯(cuò)誤或取材不當(dāng)導(dǎo)致了細(xì)胞的死亡．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁．細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
3、培養(yǎng)條件：
（1）無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境：無(wú)菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無(wú)毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害．
（2）營(yíng)養(yǎng)：
成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．O₂：是細(xì)胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）通常在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染．
（2）在動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中，在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入血清、血漿等天然成分，補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)．
（3）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，因此要定期用胰蛋白酶處理細(xì)胞，分散細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸浮液．
（4）若保存細(xì)胞，通常在液氮（或冷凍）條件下，因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中酶的活性降低，細(xì)胞代謝速率降低．
（5）從科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)性的角度考慮，這些細(xì)胞的死亡可能是該種細(xì)菌作用，也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯(cuò)誤或取材不當(dāng)，導(dǎo)致了細(xì)胞的死亡．
故答案為：
（1）防止細(xì)菌污染 
（2）補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)
（3）接觸抑制        胰蛋白酶 
（4）冷凍（或超低溫、液氮）
（5）不能     也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯(cuò)誤或取材不當(dāng)導(dǎo)致了細(xì)胞的死亡

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和原理等，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷生物學(xué)問(wèn)題的能力．