Question

6．根據(jù)教材知識(shí)填空
（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法包括，①從基因文庫中獲取目的基因，②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，③化學(xué)方法直接人工合成目的基因．
（2）在質(zhì)粒中常見的標(biāo)記基因有四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、熒光蛋白基因等（至少寫兩種）．若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌．
（3）將目的基因?qū)�入微生物常用Ca²⁺處理受體細(xì)胞，使之變成感受態(tài)細(xì)胞．我國(guó)科學(xué)家發(fā)明的將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法是花粉管通道法．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法包括：①從基因文庫中獲取目的基因，②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，③化學(xué)方法直接人工合成目的基因．
（2）在質(zhì)粒中常見的標(biāo)記基因有四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、熒光蛋白基因等．若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌．
（3）受體細(xì)胞是微生物時(shí)，需要將微生物常用Ca²⁺（或CaCl₂）處理受體細(xì)胞，使之變成感受態(tài)細(xì)胞． 花粉管通道法是我國(guó)科學(xué)家發(fā)明的將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法．
故答案為：
（1）PCR技術(shù)           化學(xué)方法直接人工合成目的基因
（2）四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、熒光蛋白基因等        大腸桿菌
（3）Ca²⁺（或CaCl₂）    花粉管通道法

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟中，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．