Question

3．金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性，在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．下面是某研究小組測定自來水中金黃色葡萄球菌濃度的實驗操作．
（1）金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基為7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，根據(jù)實驗?zāi)康膽?yīng)選擇固體（填“固體”、或“液體”）培養(yǎng)基；不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間．霉菌一般在25-28℃的溫度下培養(yǎng)3-4d．
（2）在制作血平板時需等平板冷卻后，方可加入血液，以防止高溫破壞血細(xì)胞．
（3）取10mL自來水樣，加入90mL無菌水，稀釋成10^-1的自來水樣，依次操作，制作稀釋10^-2、10^-3、10^-4的自來水樣．
（4）將0.1mL10 ^-1〜10^-4的四個稀釋樣液，分別接種到4組（每組3個）血平板上的方法是稀釋涂布平板法．在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周圍會出現(xiàn)透明圈（溶血圈）．若在10^-3組的3個血平板上，黃色葡萄球菌菌落數(shù)分別為40、36和35，則每升自來水中的活菌數(shù)約為3.7×10⁸個．

Answer 1

分析 1、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
2、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：
①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．

解答 解：（1）7.5%NaCl不影響金黃色葡萄球菌生長的同時抑制其它菌的生長，因此培養(yǎng)基中加入7.5%NaCl利于金黃色葡萄球菌的篩選，則該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間．霉菌一般在22～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4天．
（2）在制作血平板時需等平板冷卻后，方可加入血液，以防止高溫破壞血細(xì)胞．
（3）取10mL自來水樣，加入90mL無菌水稀釋成10^-1稀釋自來水樣，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀釋自來水樣．
（4）將0.1mL 10^-l～10^-4的四個稀釋樣液，分別接種到4組（每組3個）血平板上的方法是稀釋涂布平板法．根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，因此在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周圍會出現(xiàn)透明圈（溶血圈）．若在10^-3組的3個血平板上，金黃色葡萄球菌菌落數(shù)分別為40、36和35，則每升（1L=10³ml）自來水中的活菌數(shù)約為（40+36+35）÷3÷10^-3×10³×10=3.7×10⁸．
故答案為：
（1）固體          25-28          3-4
（2）高溫破壞血細(xì)胞
（3）90
（4）稀釋涂布平板法      透明圈（溶血圈）    3.7×10⁸

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠掌握培養(yǎng)基配置的方法以及類型，明確選擇培養(yǎng)基中特殊化學(xué)成分的作用以及物理性質(zhì)，掌握稀釋涂布平板法的操作步驟等．