Question

16．科學家將綠色熒光蛋白（GFP）基因轉入小鼠胚胎干細胞（ES）內，GFP基因若表達就會使細胞帶有綠色熒光，繼而利用帶有綠色熒光的ES細胞培育出嵌合型的小鼠沼于科學研究，流程如圖所示．請回答：

（1）在步驟①中構建基因表達載體時，需要在GFP基因的首端加入啟動子，RNA聚合酶識別和結合的部位，有了它才能驅動GFP基因轉錄出mRNA，最終獲得GFP．GFP基因的尾端還需有終止子，使轉錄在需要的地方停止下來．
（2）步驟②的受體細胞是小鼠ES細胞，ES細胞一般從囊胚的內細胞團分離得到．在培養(yǎng)ES細胞時，細胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制．如果想繼續(xù)培養(yǎng)則是需要重新用胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代培養(yǎng)．
（3）圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測是否有綠色熒光細胞，再通過胚胎移植技術移入代孕母鼠子宮內繼續(xù)發(fā)育．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為是轉基因綠色熒光嵌合小鼠的培育過程，其中①表示基因表達載體的構建過程；②表示將目的基因導入受體細胞的過程；③表示受精作用；④表示早期胚胎發(fā)育過程；⑤表示胚胎移植過程；⑥表示妊娠產(chǎn)生轉基因鼠的過程．

解答 解：（1）構建基因表達載體時，基因表達載體的組成中必需要有啟動子，故在GFP基因的上游必須加入啟動子，該核苷酸序列是RNA聚合酶識別和結合的部位．GFP基因的尾端還需有終止子，使轉錄在需要的地方停止下來．
（2）步驟②的受體細胞是小鼠ES細胞，ES細胞一般從囊胚的內細胞團分離得到．在培養(yǎng)ES細胞時，細胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制．要繼續(xù)培養(yǎng)，需要重新用胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代培養(yǎng)．
（3）圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測是否有綠色熒光細胞，再通過胚胎移植技術移入代孕母鼠子宮內繼續(xù)發(fā)育．
故答案為：
（1）啟動子     RNA聚合    終止子
（2）內細胞團     接觸抑制     胰蛋白酶
（3）綠色熒光細胞       胚胎移植

點評 本題結合轉基因鼠的培育過程示意圖，考查了基因工程、動物細胞工程、胚胎工程等多個現(xiàn)代生物技術，意在考查考生的識記能力和綜合運用能力．