Question

運(yùn)用動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位．研究發(fā)現(xiàn)：用人的細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體．雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過(guò)程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失，只剩一條或幾條．如圖是人的缺乏 HGPRT 酶突變細(xì)胞株（ HGPRT^-）和小鼠的缺乏 TK 酶細(xì)胞株（ TK ^一）融合后并在 HAT 培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過(guò)程，結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅存有 3 號(hào)染色體或 17 號(hào)染色體或兩者都有．已知只有同時(shí)具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細(xì)胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖．
（ l ）體細(xì)胞雜交克服了

 

，過(guò)程 ①常用的生物方法是

 

（ 2 ）過(guò)程 ②中，為了防止細(xì)菌的污染，所用培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的

 

，此外還要定期用

 

處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（ 3 ）從培養(yǎng)過(guò)程看，HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起

 

作用
（ 4 ）從圖示結(jié)果看，可以確定人的

 

基因位于

 

號(hào)染色體；該方法可以對(duì)鼠基因定位嗎？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：細(xì)胞融合的概念及方法,動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程

專題：

分析：根據(jù)題意可以看出，該技術(shù)可以對(duì)人的TK酶基因進(jìn)行定位．該技術(shù)中利用了細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清等天然物質(zhì)；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂．

解答： 解：（1）體細(xì)胞雜交打破了生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，動(dòng)物細(xì)胞融合的方法中常用的生物法為滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)．
（2）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為了防止細(xì)菌的污染，培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的抗生素．由于動(dòng)物細(xì)胞具有接觸抑制的現(xiàn)象，因此要定期用胰蛋白酶處理細(xì)胞，使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液．
（3）根據(jù)題意可知，“只有同時(shí)具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細(xì)胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖”，因此HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起選擇（篩選）作用．
（4）從培養(yǎng)結(jié)果可以看出，培養(yǎng)獲得的細(xì)胞中均具有鼠的全部染色體，但是只有含人的17號(hào)染色體的細(xì)胞存活下來(lái)，由此可得，人的TK酶基因位于17號(hào)染色體．由于鼠的染色體沒(méi)有缺失，因此不可以對(duì)鼠的基因進(jìn)行定位．
故答案為：
（ l ）遠(yuǎn)緣雜交不親和（或生殖隔離） 用滅活的（仙臺(tái)/動(dòng)物） 病毒誘導(dǎo)融合
（ 2 ）抗生素胰蛋白酶
（ 3 ）選擇（篩選）
（ 4 ） TK 酶  17   不能

點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以及基因定位的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力、圖文轉(zhuǎn)換能力和理解能力，難度適中，只要記住相關(guān)知識(shí)點(diǎn)即可得出正確答案．