Question

11．葡萄酒酵母（C1）具有良好的發(fā)酵性能，但分解蘋果酸能力差，過多的蘋果酸會使葡萄酒有酸澀感，解蘋果酸裂殖酵母（Ml）具有極強的降解蘋果酸能；但發(fā)酵性能極差．為了培育新型酵母菌菌種，科研人員采用了以下步驟進(jìn)行育種．請分析回答：

（1）步驟一：制備原生質(zhì)體．培養(yǎng)Cl、Ml單倍體親株，加入一定量的0.5%的蝸牛酶液，保溫處理一段時間，用一定濃度的高滲緩沖液洗滌，以確保獲得更多的原生質(zhì)體．
①本實驗中，蝸牛酶液的作用是去除細(xì)胞壁．
②在無菌條件下，用A（A：高滲緩沖液、B：低滲緩沖液、C：生理鹽水）洗滌，以確保獲得更多的原生質(zhì)體．
③改變蝸牛酶液濃度進(jìn)行多組實驗，結(jié)果見圖1，分別計算酶濃度為1和1.5時的形成率與再生率，相比較酶濃度為1.5%時更適宜．
（2）步驟二：誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合．取Cl、Ml原生質(zhì)體懸浮液等量混合，離心去除上清液，加入一定量40%的聚乙二醇（PEG）溶液，30℃保溫20min，鏡檢并觀察融合情況．
（3）步驟三：融合子的鑒定．測定細(xì)胞體積及DNA含量，結(jié)果見表1，從中挑選出融合子Z13、Z15、Z19、Z29，理由是細(xì)胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4）．
（4）步驟四：融合子發(fā)酵性能的測定．測定融合子與親株的降糖能力和降酸能力，圖2和圖3是對Z29和親株的測定結(jié)果，據(jù)圖分析可以得出的結(jié)論是Z29的降糖能力和降酸能力均較好，表明融合了兩親株的優(yōu)良性狀．

Answer 1

分析 本題植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的遷移應(yīng)用，需要考生結(jié)合植物體細(xì)胞雜交的過程及圖表中信息答題．

解答 解：（1）①真菌細(xì)胞具有細(xì)胞壁，要獲取原生質(zhì)體需要進(jìn)行去壁處理．因此，本實驗中，蝸牛酶液的作用是去除細(xì)胞壁．
②根據(jù)步驟一“用一定濃度的高滲緩沖液洗滌”可知，在無菌條件下，用高滲緩沖液洗滌，以確保獲得更多的原生質(zhì)體．
③與酶濃度為1時相比，酶濃度為1.5時，原生質(zhì)體的形成率隨略有降低，但其再生率明顯升高，因此相比較酶濃度為1.5%時更適宜．
（2）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可采用誘導(dǎo)劑--聚乙二醇（PEG）．
（3）根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，融合子Z13、Z15、Z19、Z29細(xì)胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4）．
（4）根據(jù)圖2和圖3可知，Z29的降糖能力和降酸能力均較好，表明其融合了兩親株的優(yōu)良性狀．
故答案為：
（1）去除細(xì)胞壁  A  1.5%
（2）聚乙二醇（PEG）
（3）細(xì)胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4）
（4）Z29  融合了兩親株的優(yōu)良性狀

點評 本題考查細(xì)胞融合技術(shù)，要求考生識記誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法，能根據(jù)題干要求完善實驗步驟，同時要求考生能正確分析圖表，從中提取有效信息答題，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查．