Question

13．浙江大學農學院喻景權教授課題組研究發(fā)現，一種植物激素--油菜素內酯能促進農藥在植物體內的降解和代謝．用油菜素內酯處理后，許多參與農藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）表達和酶活性都得到提高，在這些基因“指導”下合成的蛋白酶能把農藥逐漸轉化為水溶性物質或低毒甚至無毒物質，有的則被直接排出體外．某課題組進一步進行了如下的實驗操作，請回答下列問題．

（1）步驟①用PCR技術擴增基因時用到的耐高溫酶通常是指熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）；步驟②用到的酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）圖中導入重組質粒的方法是轉化法，在導入之前應用氯化鈣溶液處理受體細菌．
（3）PCR技術的原理是DNA的復制（或DNA分子的復制）；在培養(yǎng)基中加入紅霉素可將含有目的基因的細胞篩選出來．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①表示采用PCR技術擴增目的基因，②表示基因表達載體的構建過程，③表示將目的基因導入受體細胞，④⑤表示篩選過程．

解答 解：（1）PCR技術擴增基因時用到的耐高溫酶通常是指熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）；②為基因表達載體的構建過程，該過程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（2）圖中受體細胞是微生物細胞，將目的基因導入微生物細胞常用農桿菌轉化法，即用氯化鈣溶液處理受體細菌，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（3）PCR技術的原理是DNA的復制（或DNA分子的復制）；由圖可知，抗性基因是紅霉素基因，因此在培養(yǎng)基中加入紅霉素可將含有目的基因的細胞篩選出來．
故答案為：
（1）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）　限制酶和DNA連接酶　
（2）轉化法　氯化鈣溶液
（3）DNA的復制（或DNA分子的復制）　紅霉素

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合圖中信息準確答題．