Question

9．蝦青素具有很強(qiáng)的抗光氧化能力，能有效防止果實(shí)在高溫和強(qiáng)光下被灼傷．蘋(píng)果缺乏?-胡蘿卜素酮化酶基因（bkt）（合成蝦青素的關(guān)鍵基因），不能合成蝦青素．如圖表示研究者培育轉(zhuǎn)bkt基因蘋(píng)果的流程圖（gus為能在蘋(píng)果細(xì)胞表達(dá)的基因）．請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題

（1）步驟①中bkt基因能在蘋(píng)果細(xì)胞表達(dá)，需與gus基因的啟動(dòng)子、終止子重組在一起，bkt兩端應(yīng)具有BamHⅠSacⅠ酶切位點(diǎn)．
（2）步驟③，為了獲得含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，將重組Ti質(zhì)粒與處于感受態(tài)的農(nóng)桿菌混合．
（3）導(dǎo)人成功后，由于農(nóng)桿菌等細(xì)菌對(duì)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)不利，可在培養(yǎng)基中添加抗生素，抑制農(nóng)桿菌等細(xì)菌生長(zhǎng)．
（4）轉(zhuǎn)基因成功的鑒定：可把轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果至于高溫、強(qiáng)光條件下培養(yǎng)，觀察其生長(zhǎng)狀況．
（5）為了使轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果的生產(chǎn)不受季節(jié)、氣候及地域的限制，選擇B中培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽，經(jīng)包裝得到人工種子．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示研究者培育轉(zhuǎn)bkt基因蘋(píng)果的流程圖，其中①表示獲取目的基因的過(guò)程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；③④表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；⑤表示脫分化過(guò)程；⑥表示再分化過(guò)程．

解答 解：（1）由圖可知，啟動(dòng)子與bkt基因的結(jié)合部位有BamHⅠ酶切位點(diǎn)，bkt基因與終止子結(jié)合位點(diǎn)有SacⅠ酶切位點(diǎn)，因此bkt兩端應(yīng)具有BamHⅠ和SacⅠ酶切位點(diǎn)．
（2）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用氯化鈣處理微生物細(xì)胞，使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．因此步驟③中，為了獲得含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，將重組Ti質(zhì)粒與處于感受態(tài)的農(nóng)桿菌混合．
（3）抗生素能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，因此導(dǎo)人成功后，由于農(nóng)桿菌等細(xì)菌對(duì)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)不利，可在培養(yǎng)基中添加抗生素，抑制農(nóng)桿菌等細(xì)菌生長(zhǎng)．
（4）蝦青素具有很強(qiáng)的抗光氧化能力，能有效防止果實(shí)在高溫和強(qiáng)光下被灼傷．因此，轉(zhuǎn)基因（bkt基因）成功的鑒定方法是：把轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果至于高溫、強(qiáng)光條件下培養(yǎng)，觀察其生長(zhǎng)狀況．
（5）為了使轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果的生產(chǎn)不受季節(jié)、氣候及地域的限制，選擇B中培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽，經(jīng)包裝得到人工種子．
故答案為：
（1）BamHⅠSacⅠ
（2）感受態(tài)
（3）抗生素
（4）高溫、強(qiáng)光
（5）胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．