Question

16．根據(jù)如圖1所示回答問(wèn)題．請(qǐng)回答：

限制酶	BamHI	HindⅢ	EcoRI	SmaI	MspI
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)

（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有①②③④（填序號(hào)）．
①標(biāo)記基因②多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)③對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害
④能自我復(fù)制⑤起始密碼子
（2）若對(duì)天然質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的 SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性將會(huì)提高．
（3）在如圖2上寫出目的基因左右兩側(cè)分別被 SmaⅠ和 EcoRⅠ切割后的末端（答案寫在答題紙的圖上）哪一種基因工程的 基本工具可以連接平末端T₄DNA連接酶．

Answer 1

分析 1、分析題干：基因工程技術(shù)包含①目的基因的獲取、②基因表達(dá)載體的構(gòu)建、③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．
2、載體具備的條件：
①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存．
②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入．
③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇．

解答 解：（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有①標(biāo)記基因、②多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、③對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害和④能自我復(fù)制，而⑤起始密碼子位于mRNA上．
（2）堿基之間的配對(duì)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，即C-G，A-T，且C和G之間有3個(gè)氫鍵，A和T之間有2個(gè)氫鍵，因此C和G的含量越高，DNA分子熱穩(wěn)定性也越高．SmaⅠ酶切位點(diǎn)中均為C-G堿基對(duì)，因此插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒中的C和G的含量就越高，其熱穩(wěn)定性也越高．
（3）據(jù)圖分析得到在如圖2上目的基因左右兩側(cè)分別被 SmaⅠ和 EcoRⅠ切割后的末端是，基因工程中用T₄DNA連接酶連接平末端．
故答案為：
（1）①②③④
（2）提高
（3）           T₄DNA連接酶

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖表，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)；識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握其應(yīng)用，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．