Question

20．黃曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變．某些微生物能合成AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性．下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB1解毒酶的流程圖

請(qǐng)回答：
（1）基因工程常見的運(yùn)載工具（體）有質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒．將目的基因?qū)�入酵母�?xì)胞，最常用的化學(xué)方法是CaCl₂處理．
（2）酵母細(xì)胞導(dǎo)入AFB1解毒酶基因后，采用DNA分子雜交技術(shù)，檢測(cè)到AFB1解毒酶基因存在酵母細(xì)胞內(nèi)．實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)酵母菌中沒有檢測(cè)到合成的AFB1解毒酶，分析原因可能是酵母細(xì)胞中AFB1解毒酶基因沒有表達(dá)（或沒有轉(zhuǎn)錄和翻譯）．
（3）采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列．
（4）生態(tài)工程需遵循其基本原理，系統(tǒng)整體性原理強(qiáng)調(diào)各組分之間要有適當(dāng)?shù)谋壤�，只有這樣地才能順利完成能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通，并且實(shí)現(xiàn)總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB₁解毒酶的流程，Ⅰ表示提取總RNA的過程，并以此為模板逆轉(zhuǎn)錄為cDNA；Ⅱ表示采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增目的基因的過程．

解答 解：（1）基因工程的運(yùn)載工具（體）有質(zhì)粒，動(dòng)植物病毒，λ噬菌體的衍生物．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時(shí)常有感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用CaCl₂處理微生物細(xì)胞，使之處于易于吸收周圍環(huán)境中的感受態(tài)．
（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞后，常用DNA分子雜交技術(shù)；實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)酵母菌中沒有檢測(cè)到合成的AFB1解毒酶，其原因可能是酵母細(xì)胞中AFB1解毒酶基因沒有表達(dá)（或沒有轉(zhuǎn)錄和翻譯）．
（3）采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列．
（4）生態(tài)工程需遵循其基本原理，系統(tǒng)整體性原理強(qiáng)調(diào)各組分之間要有適當(dāng)?shù)谋壤�，只有這樣地才能順利完成能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通，并且實(shí)現(xiàn)總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）．
故答案為：
（1）質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒       CaCl₂處理
（2）DNA分子雜交技術(shù)     酵母細(xì)胞中AFB1解毒酶基因沒有表達(dá)（或沒有轉(zhuǎn)錄和翻譯）
（3）脫氧核苷酸序列
（4）適當(dāng)?shù)谋壤?nbsp;     總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記蛋白質(zhì)工程的基本途徑；識(shí)記生態(tài)工程的基本原理，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．