Question

20．如圖是篩選抗鏈酶素大腸桿菌的實驗步驟及相關(guān)圖解．
實驗步驟：
①把大量對鏈酶素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面，進行培養(yǎng)．
②待其長出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進行培養(yǎng)．
③在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出．
請回答：
（1）配制培養(yǎng)基時除了滿足基本的營養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、pH、氧氣的要求．
（2）從功能上看，含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍，則培養(yǎng)皿中長出的菌落顏色為黑色．由圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法．
（3）對2和3進行比較，在2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個菌落接種到含鏈霉素（含鏈霉素/不含鏈霉素）的培養(yǎng)基上，如果有較多的菌落出現(xiàn)，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前（前/后）．
（4）3中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說明了基因突變具有頻率低/低頻性的特點．

Answer 1

分析 1、影印培養(yǎng)法實質(zhì)上是使在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法．通過影印培養(yǎng)法，可以從在非選擇性條件下生長的細菌群體中，分離出各種類型的突變種．
2、突變是隨機的、不定向的，自然選擇是定向的，微生物的抗藥性突變是自發(fā)產(chǎn)生的，環(huán)境因素的作用激素自然選擇的過程．

解答 解：（1）配制基在提供幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
（2）鏈霉素是抗生素，對大腸桿菌具有選擇作用．在伊紅和美藍培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落菌落顏色為黑色．由圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法．
（3）培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上相同的菌落，是具有抗鏈霉素性狀的大腸桿菌，將其中一個菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上，出現(xiàn)較多的菌落，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前．
（4）抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變獲得的性狀，3號培養(yǎng)皿中的菌落比1號、2號中的菌落少很多，這說明了基因突變頻率很低．
故答案為：
（1）pH     氧氣（順序可顛倒）
（2）選擇    黑色    稀釋涂布平板法
（3）含鏈霉素      前
（4）頻率低/低頻性

點評 本題以實驗為載體，考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，意在考查考生的理解能力和綜合運用能力．