Question

14．回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達的問題．
（1）如圖1所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應(yīng)的E-F區(qū)域 （0.2kb），那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2A．
A．既能被E也能被F切開        B．能被E但不能被F切開
C．既不能被E也不能被F切開     D．能被F但不能被E切開
（2）已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點距限制酶E切割位點0.8kb，限制酶H切割位點距限制酶F切割位點0.5kb．若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，據(jù)表（圖2）所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為1.2kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點標注在圖3中．

（3）若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導入至山羊的受精卵細胞中．
（4）下列四幅圖中（如圖4）能正確反映目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物內(nèi)部結(jié)構(gòu)的是B．
TSS：轉(zhuǎn)錄起始位點，TTS：轉(zhuǎn)錄終止位點，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子．

Answer 1

分析 根據(jù)題中信息，限制酶具有專一性，只能識別特定的DNA序列，并在特定的位點切割磷酸二酯鍵形成DNA片段，獲取目的基因和質(zhì)粒時切割位點是E和F，重組質(zhì)粒上含有限制酶E和F的切割位點，所以既能被E也能被F切開．原來質(zhì)粒長度為3.7kb，切去EF之間的片段（0.2kb）還剩3.5kb，插入目的基因（1.2kb）后構(gòu)成重組質(zhì)粒，則重組質(zhì)粒長度為1.2+3.5=4.7kb．

解答 解：（1）用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應(yīng)的E-F區(qū)域 （0.2kb），用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故A正確．
（2）根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb，切去EF（0.2kb）之后還有3.5kb，插入目的基因后形成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒的長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，進而可推導出目的基因長度為4.7-3.5=1.2kb．重組質(zhì)粒中G的切割位點距E的切割位點0.8kb，單獨用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標示出來的G酶切位點外，還有一個G酶切位點；H的酶切位點距F0.5kb，用H單獨酶切后產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標示出來的H酶切位點外，還有一個H酶切位點；根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點標注在圖中”，可確定在EF之間分別含有一個G和H的酶切位點，進而可斷定G的識別位點，在距E點右側(cè)0.8kb處，H的識別位點在距F左側(cè)0.7kb處．目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點的位置為：

（3）將目的基因?qū)�入動物細胞中，通常以受精卵作為受體細胞，當受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達產(chǎn)物．
（4）在目的基因的起始端有啟動子，末端有終止子，因此轉(zhuǎn)錄形成的mRNA初始位置為TSS（轉(zhuǎn)錄起始位點），在末端位置有TTS（轉(zhuǎn)錄終止位點）；同時mRNA將作為蛋白質(zhì)合成的直接模板，因此其中含有起始密碼子和終止密碼子控制翻譯過程的進行，兩個密碼子分別位于TSS內(nèi)側(cè)和TTS內(nèi)側(cè)．
故答案為：
（1）A
（2）1.2    

（3）受精卵
（4）B

點評 本題綜合考查基因工程的相關(guān)內(nèi)容，涉及到基因工程常用工具酶的切割位點的確定、根據(jù)限制酶切割結(jié)果推斷目的基因的長度、基因工程中常用的受體細胞、密碼子反密碼子的推導等問題，綜合性強，有一定難度．