Question

11．某小組開展“市售鮮豬肉中大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性分析”的研究，進(jìn)行了相關(guān)實驗操作，回答下列問題：
（1）菌株的分離純化：切取鮮豬肉表層樣品接入蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，放在37℃搖床振蕩培養(yǎng)18h．取肉湯接種于瓊脂平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后再挑取單菌落，接種培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時間后，再次挑取單菌落接種于固體培養(yǎng)基上，多次重復(fù)此步驟．菌落是指由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體；操作過程中液體培養(yǎng)的目的是獲得含有大腸桿菌等菌的菌液，反復(fù)接種固體培養(yǎng)基的目的是分離純化菌落．
（2）下面是紙片擴(kuò)散法對豬大腸桿菌的耐藥性實驗．
步驟1：用打孔器制成直徑約6mm的圓形濾紙片，浸入一定濃度的氨芐西林，烘干；
步驟2：取含大腸桿菌的菌液均勻涂布于平板培養(yǎng)基上；
步驟3：在培養(yǎng)基上，每隔一定距離貼一片含藥物的圓形濾紙片，培養(yǎng)，觀察．
分析與評價：
①觀察發(fā)現(xiàn)，在每個紙片周圍都形成了抑菌圈，其直徑的大小表示大腸桿菌對氨芐西林的敏感性．抑菌圈直徑越大，敏感性越高（填“高”或“低”）．
②發(fā)現(xiàn)在抑菌圈外長滿多種不同形態(tài)的菌落，其原因可能是操作過程污染了其他微生物．
③欲比較五倍子和黃連提取液對豬大腸桿菌的抑制作用，為治療提供依據(jù)．請寫出實驗思路：取等量相同濃度的五倍子后黃連提取液，采用紙片擴(kuò)散法，比較抑菌圈的直徑大小，直徑越大，抑制作用越強(qiáng)．

Answer 1

分析 1、菌落是指一個細(xì)菌或真菌在適宜的培養(yǎng)基上繁殖后形成的肉眼可見的集合體（細(xì)菌或真菌集團(tuán)）．
2、稀釋涂布平板法計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個細(xì)胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細(xì)胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．

解答 解：（1）菌落是指由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體；分析題意可知，實驗?zāi)康氖酋r豬肉中大腸桿菌的分離鑒定，因此操作過程中液體培養(yǎng)的目的是獲得含有大腸桿菌等菌的菌液，反復(fù)接種固體培養(yǎng)基的目的是分離純化菌落．
（2）利用紙片擴(kuò)散法對豬大腸桿菌的耐藥性實驗，需要取含大腸桿菌的菌液均勻涂布于平板培養(yǎng)基上．
①觀察發(fā)現(xiàn)，在每個紙片周圍都形成了抑菌圈，其直徑的大小表示大腸桿菌對氨芐西林的敏感性．抑菌圈直徑越大，敏感性越高．
②發(fā)現(xiàn)在抑菌圈外長滿多種不同形態(tài)的菌落，可能是操作過程污染了其他微生物．
③欲比較五倍子和黃連提取液對豬大腸桿菌的抑制作用，為治療提供依據(jù)，可以取等量相同濃度的五倍子后黃連提取液，采用紙片擴(kuò)散法，比較抑菌圈的直徑大小，直徑越大，抑制作用越強(qiáng)．
故答案為：
（1）子細(xì)胞群體     獲得含有大腸桿菌等菌的菌液      分離純化菌落
（2）平板培養(yǎng)基   
①高   
②操作過程污染了其他微生物   
③取等量相同濃度的五倍子后黃連提取液，采用紙片擴(kuò)散法，比較抑菌圈的直徑大小，直徑越大，抑制作用越強(qiáng)

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠識記菌落的概念，掌握微生物分離與純化的方法，同時具有一定的實驗設(shè)計和完善的能力，難度適中．