Question

14．小鼠是繼果蠅之后的又一種模式動物，圖1表示生產(chǎn)長效胰島素轉基因小鼠培育過程示意圖，圖2表示圖1中③表達載體構建過程圖示．請回答下列問題：

（1）圖1中的過程①注射A物質的目的是使供體母鼠超數(shù)排卵，若進行體外受精，則需將未成熟的卵子培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力．
（2）在圖2中，當目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應管中有4種DNA片段，經(jīng)過程⑧形成的重組質粒上將有HindⅢ（或1種）限制酶的切點．
（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在啟動子、終止子兩種片段之間，將表達載體送入細胞時，圖1中的過程④常用的方法是顯微注射．
（4）為檢測目的基因是否成功表達，通常采用的方法是抗原-抗體雜交．

Answer 1

分析 分析圖1：圖示為某轉基因小鼠培育過程示意圖，其中①表示注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵；②表示同期發(fā)情處理；③表示基因表達載體的構建；④表示將目的基因導入受體細胞；⑤表示早期胚胎培養(yǎng)過程；⑥表示篩選；⑦表示胚胎移植過程．
分析圖2：圖2表示圖1中③表達載體構建過程圖示．

解答 解：（1）過程①注射的激素是促性腺激素，目的是促進良種母畜超數(shù)排卵；體外受精時，要將未成熟的卵子培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力．
（2）在圖2中，目的基因的DNA含有1個HindⅢ切割位點，2個BamhⅠ切割位點，因此該目的基因DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應管中有4種DNA片段；目的基因是用限制酶HindⅢ、BamhⅠ切割獲得的，而質粒是用限制酶HindⅢ、BclⅠ切割的，由于BamhⅠ和BclⅠ切割形成的黏性末端相同，因此目的基因和質�？山�(jīng)DNA連接酶連接形成重組質粒，但重組質粒上有HindⅢ（或1種）的切點，沒有BamhⅠ和BclⅠ切點．
（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在啟動子、終止子兩種片段之間；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）為檢測目的基因是否成功表達，通常采用抗原-抗體雜交法．
故答案為：
（1）超數(shù)排卵    減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）
（2）4     HindⅢ（或1種）
（3）啟動子、終止子    顯微注射
（4）抗原-抗體雜交

點評 本題結合某轉基因小鼠培育過程示意圖，考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及具體步驟，掌握各步驟中注意的細節(jié)問題；識記胚胎移植的基本程序，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．