Question

14．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)微生物分解后能更好的被植物利用．某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并成功篩選到能高效分解尿素的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示．

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	lg	15g

將表中物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL．實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示：
回答下列問(wèn)題：
（1）該培養(yǎng)基能篩選出目的菌的原因是該選擇培養(yǎng)基中的唯一氮源是尿素．
（2）圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上接種時(shí)，可采用的方法是稀釋涂布平板法．初步篩選出來(lái)的菌種還需要進(jìn)一步的鑒定：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，則可說(shuō)明該菌種能夠分解尿素．
（3）在實(shí)驗(yàn)中，下列材料或用具需要滅菌的是①②，需要消毒的是③（填序號(hào)）．
①培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻棒、試管、錐形瓶和吸管
③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手
（4）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約50個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約20個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有①②③（填序號(hào)）．
①所取土樣不同 ②培養(yǎng)基被污染 ③接種操作錯(cuò)誤 ④沒有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)
（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．選擇培養(yǎng)基的目的是篩選目的菌，在固體培養(yǎng)基上接種的方法通常是稀釋涂布平板法和平板劃線法．接種過(guò)程中培養(yǎng)基、接種器具要滅菌，操作者的雙手和環(huán)境要消毒．

解答 解：（1）選擇培養(yǎng)基的是指在培養(yǎng)基上加入某種化學(xué)試劑，以抑制不需要微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要微生物的生長(zhǎng)．該培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選出能分解尿素的細(xì)菌．
（2）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)常用的接種方法是涂布平板法或平板劃線法．尿素分解菌可以用酚紅指示劑進(jìn)行鑒定，原因是其體內(nèi)產(chǎn)生的脲酶能夠?qū)⒛蛩剞D(zhuǎn)化為氨是酚紅指示劑呈紅色．
（3）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要進(jìn)行滅菌處理；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手需要進(jìn)行消毒．
（4）該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒有進(jìn)行無(wú)菌操作．故選：①②③．
（5）為避免污染環(huán)境與操作者，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉．
故答案為：
（1）該選擇培養(yǎng)基中的唯一氮源是尿素
（2）稀釋涂布平板法   酚紅   紅
（3）①②③
（4）①②③
（5）滅菌

點(diǎn)評(píng) 對(duì)于微生物培養(yǎng)技術(shù)、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、培養(yǎng)基為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分、常用的接種方法和具體操作過(guò)程的理解把握知識(shí)點(diǎn)間的內(nèi)在聯(lián)系是解題的關(guān)鍵．