Question

15．萌發(fā)的大麥種子中存在著兩種淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶耐熱不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐熱，70℃處理15min即變性失活．為測(cè)定萌發(fā)種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差異，將發(fā)芽3天的大麥種子加蒸餾水研磨勻漿、離心取上清液得到淀粉酶提取液，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)．

操作步驟		1號(hào)試管	2號(hào)試管	3號(hào)試管
①	加淀粉酶提取液	1ml	1ml	1ml
②	預(yù)處理	70℃恒溫水浴15min， 取出冰浴中冷卻	高溫使α-淀粉酶 和β-淀粉酶失活	不處理
③	加緩沖液	2ml	2ml	2ml
④	預(yù)保溫	40℃恒溫水浴 10min
⑤	加40℃預(yù)熱的 淀粉溶液	2ml	2ml	2ml
⑥	保溫	40℃恒溫水浴5min
⑦	測(cè)定	加入試劑X，50～65℃水浴5min，測(cè)定磚紅色沉淀物的量

回答下列問(wèn)題：
（1）步驟⑦中加入的試劑X為斐林試劑．
（2）上述實(shí)驗(yàn)操作步驟中，步驟②中對(duì)1號(hào)試管進(jìn)行操作的目的是使β-淀粉酶變性失活；為達(dá)成實(shí)驗(yàn)?zāi)康模�設(shè)置的1、2、3號(hào)試管中，為對(duì)照組的一組是2號(hào)試管．
（3）通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)，能大致比較萌發(fā)3天時(shí)種子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大�。�比較的方法是測(cè)定各試管沉淀物的量，1、2號(hào)試管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1號(hào)試管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示該酶的活性大．

Answer 1

分析 本實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)定萌發(fā)種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差異；發(fā)的大麥種子中存在著兩種淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶耐熱不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐熱，70℃處理15min即變性失活．若測(cè)定大麥種子中α-淀粉酶催化效率，因此要根據(jù)β-淀粉酶不耐熱，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干擾．淀粉酶能將淀粉水解成還原糖，而還原糖可以用斐林試劑進(jìn)行鑒定．

解答 解：（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)定萌發(fā)種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差異，淀粉酶分解淀粉為還原糖，還原糖可以用斐林試劑進(jìn)行鑒定，步驟⑦中加入的試劑X為斐林試劑．
（2）β-淀粉酶耐酸不耐熱，70℃處理15min即變性失活．上述實(shí)驗(yàn)操作步驟中，步驟②中對(duì)1號(hào)試管進(jìn)行操作的目的是使β-淀粉酶變性失活，測(cè)定大麥種子中α-淀粉酶催化效率，為達(dá)成實(shí)驗(yàn)?zāi)康模�設(shè)置的1、2、3號(hào)試管中，為對(duì)照組的一組是2號(hào)試管（2號(hào)試管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活，不能將淀粉變?yōu)檫�原糖，2號(hào)和1號(hào)對(duì)比能測(cè)定α-淀粉酶催化效率）．
（3）通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)，可以測(cè)定各試管沉淀物的量，1、2號(hào)試管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1號(hào)試管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示該酶的活性大，從而能大致比較萌發(fā)3天時(shí)種子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大�。�
故答案為：
（1）斐林試劑
（2）使β-淀粉酶變性失活    2
（3）測(cè)定各試管沉淀物的量，1、2號(hào)試管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1號(hào)試管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示該酶的活性大

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖表，考查探究影響酶活性的因素、檢測(cè)還原糖實(shí)驗(yàn)、探究實(shí)驗(yàn)，要求考生能根據(jù)題干信息“α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐熱，在70℃15min后失活”完善實(shí)驗(yàn)步驟，能還原糖檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的原理對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)．