Question

4．培養(yǎng)基的配制廣泛應(yīng)用于微生物培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)等技術(shù)中．如表為某微生物培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答相關(guān)問題：

成分	含量	成分	含量
Na2HPO4	2.1g	尿素	1.0g
KH2PO4	1.4g	C6 H12 O6	10.0g
MgSO4•7H2O	0.2g	瓊脂	15.0g
NH4NO3	0.3g	H2 O	1 000mL

（1）該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分屬于固體培養(yǎng)基．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）如果用該培養(yǎng)基分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)除去的物質(zhì)是NH₄NO₃．除去該物質(zhì)后，只有能合成脲酶的微生物才能生長，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基．
（3）在培養(yǎng)過程中為了檢驗(yàn)制備的培養(yǎng)基是否合格，采取的措施是設(shè)置未接種的空白培養(yǎng)基在相同的條件下培養(yǎng)，如果空白培養(yǎng)基上沒有長出菌落，說明培養(yǎng)基制備成功，否則需要重新制備．
（4）一般采用稀釋涂布平板法分離尿素分解菌，其實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過多，連成一片．請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼母倪M(jìn)措施：增大菌液的稀釋倍數(shù)．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)．營養(yǎng)物質(zhì)歸納為碳源、氮源、生長因子、無機(jī)鹽和水．根據(jù)化學(xué)成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基．根據(jù)性質(zhì)分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基．
2、防止雜菌污染時(shí)貫穿實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程，如對(duì)環(huán)境、生物材料、操作者雙手等進(jìn)行消毒，對(duì)培養(yǎng)基、接種環(huán)和培養(yǎng)儀器進(jìn)行滅菌．
3、尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠把尿素分解為氨使pH升高，與酚紅指示劑反應(yīng)后呈紅色．篩選尿素分解菌要使用一尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，篩選分離時(shí)常用稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答 解：（1）由于該培養(yǎng)基中加入了凝固劑--瓊脂，所以該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分屬于固體培養(yǎng)基．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法．
（2）分離土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)該用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，因此如果用該培養(yǎng)基分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)除去的物質(zhì)是NH₄NO₃．除去該物質(zhì)后，只有能合成脲酶的微生物才能生長，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基．
（3）在培養(yǎng)過程中，可設(shè)置未接種的空白培養(yǎng)基在相同的條件下培養(yǎng)，如果空白培養(yǎng)基上沒有長出菌落，則說明制備的培養(yǎng)基合格，培養(yǎng)基制備成功．
（4）采用稀釋涂布平板法分離尿素分解菌時(shí)，如果結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過多，連成一片，可增大菌液的稀釋倍數(shù)．
故答案為：
（1）固體        高壓蒸汽滅菌
（2）NH₄NO₃       選擇
（3）設(shè)置未接種的空白培養(yǎng)基在相同的條件下培養(yǎng)     空白培養(yǎng)基上沒有長出菌落
（4）稀釋涂布平板法   增大菌液的稀釋倍數(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)原理，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．