Question

12．如圖為某種哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程圖．回答下列問題．

（1）①處需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)需要O₂和CO₂，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（2）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)進(jìn)行去核．與去核卵母細(xì)胞融合的供體細(xì)胞培養(yǎng)一般不會(huì)超過10代，原因是10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）．激活受體細(xì)胞除了用電刺激的方法外，還可以用鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等．（寫一種實(shí)際方法）
（3）動(dòng)物細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植的原因是動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性十分困難．

Answer 1

分析 體細(xì)胞核移植過程：（以克隆高產(chǎn)奶牛為例）

注意：
①細(xì)胞核移植技術(shù)中注入去核卵母細(xì)胞中的不是供體細(xì)胞核，而是整個(gè)細(xì)胞，伴隨著兩細(xì)胞融合，體現(xiàn)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有一定的流動(dòng)性．
②受體細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞，此時(shí)在透明帶內(nèi)包含著第一極體，在去核的同時(shí)連同第一極體一并去掉．
③該技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性．
④用卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞原因：a．卵母細(xì)胞體積大，便于操作；b．含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；c．營養(yǎng)物質(zhì)豐富
⑤克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致．

解答 解：（1）細(xì)胞貼壁后，用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理使細(xì)胞分散，制成細(xì)胞懸液．細(xì)胞培養(yǎng)需要提供O₂和CO₂等氣體環(huán)境，CO₂的作用主要是維持培養(yǎng)液的pH．
（2）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)進(jìn)行去核．10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)），因此一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞．激活受體細(xì)胞可以用物理和化學(xué)方法，如電刺激、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等．
（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性十分困難，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）      維持培養(yǎng)液的pH
（2）減數(shù)第二次分裂中期     10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）              鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等
（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性十分困難

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植，要求考生識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植的概念及過程，利用所學(xué)的知識(shí)，準(zhǔn)確判斷圖中各過程采用的技術(shù)手段．