Question

以下為人工合成reAnti基因，轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞，做成轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）構(gòu)建的重組質(zhì)粒除了要有reAnti基因和標(biāo)記基因外，還要有

 

和

 

．
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后，要通過(guò)DNA分子雜交技術(shù)，來(lái)檢測(cè)reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的

 

上．
（3）從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用

 

處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)，將培養(yǎng)瓶置于含

 

的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（4）去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到

 

期．其去核后與成纖維細(xì)胞通過(guò)電刺激后融合，形成重組細(xì)胞，再利用物理或化學(xué)方法刺激，使之完成細(xì)胞

 

，在體外培養(yǎng)成重組早期胚．
（5）在進(jìn)行過(guò)程⑦操作前，應(yīng)用激素對(duì)受體母豬進(jìn)行

 

處理．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：分析題圖：①是獲取目的基因的過(guò)程；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的過(guò)程；④采用顯微技術(shù)去核；⑤是核移植過(guò)程；⑥動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程；⑦是胚胎移植過(guò)程；⑧是妊娠形成轉(zhuǎn)基因克隆豬的過(guò)程．

解答： 解：（1）基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子，所以構(gòu)建的重組質(zhì)粒除了要有reAnti基因和標(biāo)記基因外，還要有啟動(dòng)子和終止子．
（2）目的基因（reAnti基因）是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體上，可用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，使動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要放入到95%的空氣（保證細(xì)胞代謝）和5%CO₂（調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的PH）培養(yǎng)箱中．
（4）去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，其去核后與成纖維細(xì)胞通過(guò)電刺激后融合，形成重組細(xì)胞，再利用物理或化學(xué)方法刺激，使之完成細(xì)胞分裂和發(fā)育，在體外培養(yǎng)成重組早期胚．
（5）在進(jìn)行胚胎移植前，需要對(duì)受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境．
故答案：（1）（Anti基因的）啟動(dòng)子  終止子  
（2）染色體DNA
（3）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）     95%空氣加5%CO₂
（4）MII中  分裂和發(fā)育  
（5）同期發(fā)情

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，解決生物學(xué)問(wèn)題的能力．