Question

15．如表是幾種限制酶識別序列和切割位點，如圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的技術(shù)流程，請據(jù)圖回答：

限制酶	BamHⅠ	BfuCⅠ	XmaⅠ	SmaⅠ
識別序列及切割位點	G↓GATCC	↓GATC	C↓CCGGG	CCC↓GGG

（1）依據(jù)表中四種酶切割位點，會形成相同末端的是BamHⅠ和 BfuCⅠ，從不同酶的識別序列上看，限制酶的作用特點是能識別特定的核苷酸序列并在特定位點切割雙鏈DNA．
（2）根據(jù)表中酶切位點，請寫出BamHⅠ切割后形成的末端：．
（3）圖中過程①中涉及的酶是限制酶和DNA連接酶，該過程是基因工程的核心步驟，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時能表達并發(fā)揮作用．
（4）圖中過程②最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞DNA分子上的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（5）經(jīng)檢測抗蟲棉細胞染色體上含有一個抗蟲基因，該植株自交得到F_l，其中全部的抗蟲植株再自交一次，后代中抗蟲植株占總數(shù)的$\frac{5}{6}$．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：①是基因表達載體的構(gòu)建過程，②是將目的基因?qū)�入受體細胞的過程，③是脫分化過程，④是再分化過程．
基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）依據(jù)表中四種酶切割位點，會形成相同末端的是BamHⅠ和BfuCⅠ，產(chǎn)生的末端都是-GATC-；從不同酶的識別序列上看，說明限制酶具有能識別特定的核苷酸序列并在特定位點切割雙鏈DNA的作用特點．
（2）根據(jù)表中酶切位點，BamHⅠ切割后形成的末端是．
（3）在基因表達載體的構(gòu)建過程中，涉及的酶是限制酶和DNA連接酶，該過程是基因工程的核心步驟，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時能表達并發(fā)揮作用．
（4）圖中過程②是將目的基因?qū)�入受體細胞，最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞DNA分子上的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（5）抗蟲棉細胞染色體上含有一個抗蟲基因（用A表示），那么該植株可看做是雜合子（Aa），自交得到的F_l有三種基因型（AA、Aa、aa），如果其中全部的抗蟲植株（$\frac{1}{3}$AA、$\frac{2}{3}$Aa）再自交一次，那么后代中不抗蟲植株占$\frac{2}{3}×\frac{1}{4}$=$\frac{1}{6}$，抗蟲植株占1-$\frac{1}{6}$=$\frac{5}{6}$．
故答案為：
（1）BamHⅠ和BfuCⅠ能識別特定的核苷酸序列并在特定位點切割雙鏈DNA．
（2）
（3）限制酶和DNA連接酶     使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并能遺傳給下一代，同時能表達并發(fā)揮作用
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法                   DNA分子雜交技術(shù)
（5）$\frac{5}{6}$

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關細節(jié)，能正確分析題圖，再結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．