Question

5．如圖為培育抗病轉(zhuǎn)基因植物操作過(guò)程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）抗病基因與載體結(jié)合常用相同的限制酶和DNA連接酶處理，獲得的重組運(yùn)載體通過(guò)顯微注射方法導(dǎo)入球形原生質(zhì)體中．
（2）圖中①表示脫分化，培養(yǎng)過(guò)程中需保持無(wú)菌，防止雜菌污染，愈傷組織需適當(dāng)配比的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)．
（3）抗病轉(zhuǎn)基因植物獲得的原理是基因重組和植物細(xì)胞全能性．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
圖示表示培育抗病轉(zhuǎn)基因植物的過(guò)程，其原理是植物細(xì)胞具有全能性，其中①是脫分化過(guò)程．

解答 解：（1）用同種限制酶切割能形成相同的黏性末端，在DNA連接酶的作用下可形成重組DNA．獲得的重組運(yùn)載體通過(guò)顯微注射方法導(dǎo)入原生質(zhì)體中．由于原生質(zhì)體外沒(méi)有細(xì)胞壁，呈現(xiàn)球形．
（2）圖中①表示脫分化，培養(yǎng)過(guò)程中需保持無(wú)菌，防止雜菌污染，愈傷組織需適當(dāng)配比的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)．
（3）獲得抗病轉(zhuǎn)基因植物需要基因工程技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，相關(guān)的原理是基因重組和植物細(xì)胞全能性．
故答案為：
（1）相同的限制酶和DNA連接酶     顯微注射     球
（2）脫分化    無(wú)菌     營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
（3）基因重組和植物細(xì)胞全能性

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合流程圖，考查植物組織培養(yǎng)和基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)圖能力和識(shí)記能力；能理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確判斷的能力．