Question

2．如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答：

（1）過程①不能利用人的肝臟細胞來完成，原因是肝臟細胞中的胰島素基因不表達（轉(zhuǎn)錄）．
（2）過程②稱為反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄），可以用二苯胺（試劑）檢驗該過程產(chǎn)物的化學(xué)本質(zhì)．
（3）在體外得到大量DNA的PCR技術(shù)，與體內(nèi)DNA復(fù)制的不同之處主要表現(xiàn)在溫度環(huán)境的要求不同．PCR中首先用95℃高溫處理，目的是使DNA解旋（兩條鏈解開螺旋），而這一過程在細胞內(nèi)是通過解旋酶實現(xiàn)的．PCR過程中的引物實質(zhì)是單鏈DNA．
（4）⑦過程要用到DNA連接酶從而形成重組分子，為使⑧過程更易進行，應(yīng)用Ca²⁺處理大腸桿菌．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖．圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉(zhuǎn)錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達載體的構(gòu)建過程；⑧表示將目的基因?qū)�入受體細胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過程．

解答 解：（1）①過程是從胰島細胞中獲取胰島素mRNA的過程，由于在基因表達是選擇性表達的，人的肝臟細胞中不轉(zhuǎn)錄出胰島素mRNA，因此不能利用人的肝臟細胞來完成①過程．
（2）②為逆轉(zhuǎn)錄過程或反轉(zhuǎn)錄過程，以mRNA形成DNA的過程．在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑，因此可以用二苯胺檢驗該過程產(chǎn)物的化學(xué)本質(zhì)．
（3）PCR中首先用95℃高溫處理，目的是打開兩條鏈之間的氫鍵，使DNA解旋（兩條鏈解開螺旋）．在細胞內(nèi)是通過解旋酶使氫鍵斷裂．PCR過程中的引物實質(zhì)是單鏈DNA，可以與一段模板鏈發(fā)生堿基互補配對．
（4）⑦過程是構(gòu)建基因表達載體的過程，要用到DNA連接酶連接目的基因和運載體，從而形成重組分子．將目的基因?qū)�入微生物細胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即過程⑧用Ca²⁺對大腸桿菌進行處理，使其處于感受態(tài)．
故答案為：
（1）肝臟細胞中的胰島素基因不表達（轉(zhuǎn)錄）
（2）反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）      二苯胺
（3）使DNA解旋（兩條鏈解開螺旋）      解旋酶    單鏈DNA
（4）DNA連接      Ca²⁺

點評 本題結(jié)合利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖，考查基因工程操作步驟、細胞分化、PCR技術(shù)、DNA粗提取和鑒定實驗等知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程或物質(zhì)的名稱．識記細胞分化的概念，掌握細胞分化的實質(zhì)，明確胰島素基因只在胰島B細胞中表達，再運用所學(xué)的知識答題．