Question

某質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)，同時(shí)質(zhì)粒上還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因（如圖）．下列相關(guān)敘述錯誤的是（　　）

• A、SalⅠ酶切后可產(chǎn)生質(zhì)粒-質(zhì)粒、質(zhì)粒-抗鹽基因和抗鹽基因-抗鹽基因三種兩兩連接產(chǎn)物
• B、用SalⅠ和HindⅢ兩種限制性核酸內(nèi)切酶切可保證質(zhì)粒與抗鹽基因的定向連接
• C、用BamHⅠ和SalⅠ兩種限制性核酸內(nèi)切酶切得不到含目的基因的重組質(zhì)粒
• D、在同時(shí)添加氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中可篩選得到含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)．在質(zhì)粒上，這三種限制酶的切割位點(diǎn)都位于抗四環(huán)素基因上，用其任何一種酶都會破壞四環(huán)素抗性基因；在含抗鹽基因的DNA片段上，BamHⅠ位于目的基因上，用BamHⅠ切割會破壞目的基因．

解答： 解：A、用一種限制酶SalⅠ酶質(zhì)粒和含有目的基因的外源DNA分子所產(chǎn)生的黏性末端相同，用DNA連接酶連接時(shí)可產(chǎn)生三種連接產(chǎn)物，A正確；
B、SalⅠ和HindⅢ兩種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列不同，切割產(chǎn)生的黏性末端不同，所以用DNA連接酶連接時(shí)能保證質(zhì)粒與抗鹽基因的定向連接，B正確；
C、用BamHⅠ限制酶切割會破壞目的基因（抗鹽基因），因此用BamHⅠ和SalⅠ兩種限制性核酸內(nèi)切酶切得不到含目的基因的重組質(zhì)粒，C正確；
D、用上述限制酶切割質(zhì)粒，其上的抗四環(huán)素基因都會被破壞，所以在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能篩選得到含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，D錯誤．
故選：D．

點(diǎn)評：本題結(jié)合題圖考查基因工程的相關(guān)知識，特別是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，要求考生明確該步驟需要限制酶和DNA連接酶，至于需要哪種或哪幾種限制酶，需要考生分析題圖，選擇的限制酶要能切割含有目的基因的外源DNA分子和質(zhì)粒，但不能破壞目的基因．需要考生的注意的是B選項(xiàng)，選擇這兩種限制酶切割可以保證質(zhì)粒與抗鹽基因的定向連接．