Question

17．人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：

（1）過程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄．
（2）若通過過程②得到大量的A基因，需要用到的酶有耐高溫（熱穩(wěn)定）的特點．
（3）過程③需要用到的酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（4）過程④采用的實驗技術是動物細胞融合，最終篩選后獲得的X具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體特點．
（5）對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行RNA（堿基序列）序列比較；或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合檢測．

Answer 1

分析 本題考查單克隆抗體制備及基因工程應用知識，結合題意分析圖解得，①表示逆轉(zhuǎn)錄過程，②表示目的基因的獲取，③是構建基因表達載體，④是細胞融合，得到的是雜交瘤細胞X．
動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，最主要的用途是制備單克隆抗體．單克隆抗體的制備必須用已免疫的B淋巴（效應B淋巴）細胞和骨髓瘤細胞融合，經(jīng)2次篩選才能選出產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細胞，然后要用動物細胞培養(yǎng)技術在體外液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)．

解答 解：（1）從圖中分析可知，A基因是從病毒提取的RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA后獲得的．所以過程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄．
（2）用PCR技術可以得到大量的A基因，需要用到的酶要具有耐高溫（熱穩(wěn)定）的特點．
（3）構建基因的表達載體時，首先要用限制性核酸內(nèi)切酶切割外源DNA分子和運載體，然后再用DNA 連接酶將目的基因與外源DNA連接起來．
（4）圖中將已免疫的效應B細胞和骨髓瘤細胞通過細胞融合，然后經(jīng)過兩次篩選獲得能無限增殖并產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞．
（5）對該傳染病疑似患者確診時，可以對已知病毒RNA（堿基序列）序列進行比較或用抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合來檢測．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄     
（2）耐高溫（熱穩(wěn)定）     
（3）限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
（4）動物細胞融合       既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體
（5）RNA（堿基序列）           抗A蛋白的單克隆抗體

點評 本題難度中等，考查了基因工程、動物細胞工程的相關知識，要求考生了解基因工程的操作步驟，了解動物細胞工程在生產(chǎn)實踐中的運用，掌握單克隆抗體的制備過程．