Question

10．利用細胞工程技術(shù)制備抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體，其主要流程如下：

回答下列問題：
（1）制備抗HCG單克隆抗體過程中，用到的動物細胞工程技術(shù)有動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)．
（2）細胞DNA合成有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．在HAT培養(yǎng)中加入了氨基嘌呤，雜交瘤細胞能連續(xù)增殖，未融合細胞以及同種融合細胞因不能增殖而死亡．由此可判斷骨髓瘤細胞DNA合成存在S（填“D”、“S”或“D和S”）途徑．
（3）步驟③需對選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)及抗體檢測，該過程一般在多孔細胞培養(yǎng)板上進行．先將細胞懸浮液稀釋到7-10個細胞/ml，再在每個培養(yǎng)孔中滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的．
（4）用抗HCG單克隆抗體作出診斷試劑，能在妊娠初期即可作出診斷，主要是因為該抗體具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細胞，將效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
2、單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群．兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性．

解答 解：（1）制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養(yǎng)B淋巴細胞、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞，動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞．
（2）加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，但人的淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖．
（3）步驟③需對選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)及抗體檢測，為了使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的，一般在多孔細胞培養(yǎng)板上進行．先將細胞懸浮液稀釋到7-10個細胞/ml，再在每個培養(yǎng)孔中滴入0.1ml細胞稀釋液．
（4）單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點．
故答案為：
（1）動物細胞融合       動物細胞培養(yǎng) 
（2）S
（3）使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的
（4）特異性強、靈敏度高

點評 本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生的識圖能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查．