Question

6．制備單克隆抗體的過程中，需篩選出雜交瘤細胞．一般情況下，細胞內DNA合成除了主要途徑以外還有一條輔助途徑，而骨髓瘤細胞沒有此輔助途徑，DNA合成的主要途徑可以被氨基碟呤阻斷，利用這一特性可以篩選出雜交瘤細胞．
（1）制備單克隆抗體時，選用B淋巴細胞的原因是B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，選用骨髓瘤細胞的原因是骨髓瘤細胞可以無限增殖．研究發(fā)現(xiàn)，被激活的B淋巴細胞內含有發(fā)達的粗面內質網(wǎng)，這與產(chǎn)生大量的抗體的功能相適應．
（2）加入適量氨基碟呤的培養(yǎng)基稱為選擇 培養(yǎng)基，氨基喋呤的作用主要是為了淘汰骨髓瘤細胞及自身融合的骨髓瘤細胞．
（3）誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞進行融合常用的化學試劑是PEG．對雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)需要適CO₂，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH值．

Answer 1

分析 1．制備單克隆抗體的誘導過程有：正常小鼠免疫處理、動物細胞的融合（物、化、生法）、雜交瘤細胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗陽性細胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．
2．單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發(fā)生免疫，小鼠體內產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞．利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞．
3．雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

解答 解：（1）具有免疫能力的B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，因此制備單克隆抗體時選用B淋巴細胞．由于骨髓瘤細胞可以無限增殖，因此選用骨髓瘤細胞．效應B細胞能合成并分泌抗體，并需要粗面型內質網(wǎng)加工和高爾基體的進一步加工和運輸，所以細胞內含發(fā)達的內質網(wǎng)和高爾基體．
（2）加入適量氨基碟呤的培養(yǎng)基為選擇性培養(yǎng)基．根據(jù)題干“細胞內DNA合成除了主要途徑以外還有一條輔助途徑，而骨髓瘤細胞沒有此輔助途徑，DNA合成的主要途徑可以被氨基碟呤阻斷”，可以獲知：骨髓瘤細胞及自身融合的骨髓瘤細胞在含有氨基喋呤的培養(yǎng)基上不能存活，但雜交瘤細胞可以存活，因此氨基喋呤的作用主要是為了淘汰骨髓瘤細胞及自身融合的骨髓瘤細胞．
（3）誘導細胞融合常用的化學試劑是PEG．對雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)需要適CO₂，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH值．
故答案為：
（1）B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體    骨髓瘤細胞可以無限增殖     產(chǎn)生大量的抗體
（2）選擇       骨髓瘤細胞及自身融合的骨髓瘤細胞
（3）PEG     維持培養(yǎng)液的PH值

點評 本題考查了單克隆抗體的制備的相關知識，要求考生能夠識記單克隆抗體制備的流程、原理、篩選目的以及雜交瘤細胞、單克隆抗體的特點和應用等知識，難度適中．